Gå til innholdet
LS174T
Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumenter

LS174T

Cell line · Produktnummer 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

LS147T-cellelinjen er en variant av LS-180, som begge er avledet fra et Duke's type B adenokarsinom i tykktarmen hos en 58 år gammel hvit kvinnelig pasient. Den opprinnelige LS-180-linjen ble etablert ved å dyrke opphakket tumorvev i 10 måneder. LS-147T er, i likhet med foreldrelinjen, kjent for å uttrykke flere onkogener, inkludert myc, myb, ras og fos, mens den er negativ for andre som sis, abl og ros. Denne linjen uttrykker også høye nivåer av karsinoembryonalt antigen (CEA), interleukin 6 (IL-6) og interleukin 10 (IL-10), som er viktige markører og potensielle mål i forskning på kolorektal kreft.

Disse cellene har flere viktige kjennetegn ved epitelceller i tykktarmen, blant annet rikelig med mikrovilli og intracytoplasmatiske mucinvakuoler, som er kjennetegn som vanligvis forbindes med sekretoriske celler i tykktarmsslimhinnen. Elektronmikroskopistudier har bekreftet disse strukturelle detaljene, noe som ytterligere underbygger deres opprinnelse og differensieringsstatus. Det er viktig å merke seg at LS-147T-celler har vist seg å være tumorogene i immundepriverte mus, og at de konsekvent produserer svulster når de inokuleres subkutant i høye celletettheter, noe som bekrefter deres maligne potensial.

LS-147T-cellelinjen er dessuten spesielt verdifull i studier som fokuserer på de molekylære og immunologiske aspektene ved kolorektal kreft. Det er rapportert at denne cellelinjen er lettere å subkultivere sammenlignet med foreldrelinjen LS-180, noe som gjør den til et mer praktisk valg for langtidsstudier. Den robuste produksjonen av CEA i disse cellene, som er betydelig høyere enn i andre etablerte linjer som HT-29, gjør LS-147T til en viktig modell for å forstå dynamikken i tumormarkører og utforske målrettede terapier for kolorektal kreft.

Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Karyotype
45,x med manglende x-kromosom, men ingen andre kromosomavvik

04Identifikatorer

Kildehenvisning
LS174T (Cytion-katalognummer 300392)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA-uttrykk +
Antigenuttrykk
HLA A2, B13, B50, blodtype O
Isoenzymer
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogener
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutasjonsprofil
LS-174T-celler har en mutasjon i kodon 12 i Kras-genet: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 1944 ng/106 celler i 10 dager, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
5 til 8 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisitet
Kaukasisk