
- Vävnad
- Kolon
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Synonymer
- Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174
Dokument
LS174T
Cell line · Produktnummer 300392
The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...
Anpassning / Rekommendationer
- LS174TCell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
Cellinjen LS147T är en variant av LS-180, som båda härrör från ett adenokarcinom av Duke's typ B i tjocktarmen hos en 58-årig vit kvinnlig patient. Den ursprungliga LS-180-linjen etablerades genom odling av den malda tumörvävnaden under 10 månader. LS-147T, liksom dess föräldralinje, utmärker sig genom att uttrycka flera onkogener, däribland myc, myb, ras och fos, medan den är negativ för andra som sis, abl och ros. Denna linje uttrycker också höga nivåer av carcinoembryonalt antigen (CEA), interleukin 6 (IL-6) och interleukin 10 (IL-10), vilka är viktiga markörer och potentiella mål inom kolorektalcancerforskningen.
Dessa celler uppvisar flera viktiga kännetecken för epitelceller i tjocktarmen, bland annat rikligt med mikrovilli och intracytoplasmatiska mucinvakuoler, vilket är kännetecken som vanligtvis förknippas med sekretoriska celler i tjocktarmens slemhinna. Elektronmikroskopiska studier har bekräftat dessa strukturella detaljer, vilket ytterligare stöder deras ursprung och differentieringsstatus. Det är viktigt att notera att LS-147T-cellerna har visat sig vara tumörframkallande hos immundepriverade möss och konsekvent producerat tumörer när de inokulerats subkutant i höga celldensiteter, vilket bekräftar deras maligna potential.
Dessutom är cellinjen LS-147T särskilt värdefull i studier som fokuserar på de molekylära och immunologiska aspekterna av kolorektal cancer. Det har rapporterats att denna linje är lättare att subkultivera jämfört med sin föräldralinje, LS-180, vilket gör den till ett mer praktiskt val för långtidsstudier. Den robusta produktionen av CEA i dessa celler, som är betydligt högre än i andra etablerade linjer som HT-29, gör LS-147T till en viktig modell för att förstå dynamiken i tumörmarkörer och utforska riktade behandlingar av kolorektalcancer.
- Vävnad
- Kolon
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Synonymer
- Ls174T
- LS174t
- Ls-174-T
- LS-174-T
- LS 174 T
- LS174T
- Ls-174T
- LS 174T
- LS-174
- LS174
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Tumörframkallande
- Ja, i nakna möss
- Karyotyp
- 45,x med en x-kromosom som saknas men inga andra kromosomavvikelser
04Identifierare
- Källa
- LS174T (Cytion katalognummer 300392)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1384
05Uttryck och mottaglighet
- Proteinexpression
- Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA-uttryck +
- Antigenuttryck
- HLA A2, B13, B50, Blodgrupp O
- Isoenzymer
- ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
- Onkogener
- Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutationsprofil
- LS-174T-celler bär på en mutation i kodon 12 i Kras-genen: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
- Omvänt transkriptas
- Negativt
- Produkter
- Carcinoembryonalt antigen (CEA) 1944 ng/106 celler på 10 dagar, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Såtäthet
- 5 till 8 x 104 celler/cm2
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 58 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja