Pereiti prie turinio
LS174T
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumentai

LS174T

Cell line · Prekės numeris 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

LS147T ląstelių linija yra LS-180 atmaina, abi jos yra gautos iš 58 metų baltaodės pacientės Duke'o B tipo gaubtinės žarnos adenokarcinomos. Originali LS-180 linija buvo sukurta 10 mėnesių kultivuojant išpjautą naviko audinį. LS-147T, kaip ir jos pirminė linija, išsiskiria tuo, kad joje yra daug onkogenų, įskaitant myc, myb, ras ir fos, o kiti, pavyzdžiui, sis, abl ir ros, yra neigiami. Šioje linijoje taip pat yra didelis karcinoembrioninio antigeno (CEA), interleukino 6 (IL-6) ir interleukino 10 (IL-10), kurie yra svarbūs žymenys ir galimi taikiniai storosios žarnos vėžio tyrimuose, kiekis.

Šioms ląstelėms būdingos kelios pagrindinės storosios žarnos epitelio ląstelių savybės, įskaitant gausias mikroviliules ir intracitoplazmines mucino vakuolas, kurios paprastai būdingos storosios žarnos gleivinės sekrecinėms ląstelėms. Elektroninės mikroskopijos tyrimai patvirtino šias struktūrines detales, taip dar labiau patvirtindami jų kilmę ir diferenciacijos statusą. Svarbu tai, kad LS-147T ląstelės yra navikinės imunodeficitinėse pelėse, o įskiepijus po oda didelį ląstelių tankį, jos nuolat sukelia navikus, taip patvirtindamos savo piktybinį potencialą.

Be to, LS-147T ląstelių linija yra ypač vertinga atliekant tyrimus, skirtus storosios žarnos vėžio molekuliniams ir imunologiniams aspektams tirti. Buvo pranešta, kad šią liniją, palyginti su pagrindine linija LS-180, lengviau subkultūruoti, todėl ji yra praktiškesnis pasirinkimas ilgalaikiams tyrimams. Dėl to, kad šios ląstelės gamina didelį CEA kiekį, kuris yra gerokai didesnis nei kitų nustatytų linijų, pavyzdžiui, HT-29, LS-147T yra labai svarbus modelis siekiant suprasti naviko žymenų dinamiką ir ištirti taikinių terapiją storosios žarnos vėžio atveju.

Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Kariotipas
45,x, kai trūksta vienos x chromosomos, bet nėra kitų chromosomų aberacijų

04Identifikatoriai

Nuoroda
LS174T (Cytion katalogo numeris 300392)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA raiška +
Antigeno ekspresija
HLA A2, B13, B50, O kraujo grupė
Izofermentai
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogenai
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutacijų profilis
LS-174T ląstelės turi Kras geno 12 kodono mutaciją: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Karcinoembrioninis antigenas (CEA) 1944 ng/106 ląstelių per 10 dienų, mucinas, interleukinas-10 (IL-10), interleukinas-6 (IL-6)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
5–8 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
58 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių