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LS174T

Cell line · 제품 번호 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

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롯
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01일반 정보

설명

LS147T 세포주는 LS-180의 변종으로, 58세 백인 여성 환자의 결장 B형 선암종에서 유래한 것입니다. 오리지널 LS-180 라인은 다진 종양 조직을 10개월 동안 배양하여 확립되었습니다. LS-147T는 모주와 함께 myc, myb, ras, fos를 포함한 여러 종양 유전자를 발현하는 반면 sis, abl, ros와 같은 다른 유전자에는 음성인 것이 특징입니다. 또한 이 계통은 대장암 연구에서 중요한 마커이자 잠재적 표적인 암 배아 항원(CEA), 인터루킨 6(IL-6), 인터루킨 10(IL-10)을 높은 수준으로 발현합니다.

이러한 세포는 대장 점막의 분비 세포와 일반적으로 연관된 특징인 풍부한 미세 융모와 세포질 내 뮤신 액포를 포함하여 대장 상피 세포의 몇 가지 주요 특징을 나타냅니다. 전자 현미경 연구를 통해 이러한 구조적 세부 사항이 확인되어 세포의 기원과 분화 상태를 더욱 뒷받침합니다. 중요한 것은 LS-147T 세포가 면역 결핍 마우스에 높은 세포 밀도로 피하 접종했을 때 지속적으로 종양을 생성하는 종양 유발성을 보여 악성 잠재력을 확인했다는 점입니다.

또한 LS-147T 세포주는 대장암의 분자 및 면역학적 측면에 초점을 맞춘 연구에서 특히 유용합니다. 이 세포주는 모세포주인 LS-180에 비해 하위 배양이 용이하여 장기 연구에 더 실용적인 것으로 보고되고 있습니다. 이 세포는 HT-29와 같은 다른 기존 라인보다 훨씬 더 높은 CEA를 생산하기 때문에 LS-147T는 종양 마커 역학을 이해하고 대장암의 표적 치료법을 탐색하는 데 중요한 모델입니다.

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02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서
염색체형
45,x 염색체 1개가 결손되었지만 다른 염색체 이상은 없는 경우

04식별자

인용
LS174T(사이티온 카탈로그 번호 300392)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_1384

05발현 및 감수성

단백질 발현
결장 항원 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA 발현 +
항원 발현
HLA A2, B13, B50, 혈액형 O
이소효소
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
발암유전자
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
돌연변이 프로파일
LS-174T 세포는 Kras 유전자의 코돈 12에 돌연변이를 가지고 있습니다: GGT(Wt Gly)>GAT(Asp)
역전사효소
부정적
제품
카시노배아항원(CEA) 1944 ng/106 세포 10일, 뮤신, 인터루킨-10(IL-10), 인터루킨-6(IL-6)

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
5~8 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
58년
민족
백인