MCA-3D

La lignée cellulaire MCA-3D est dérivée de cultures primaires d'épiderme de souris qui présentent une résistance à la différenciation terminale induite par le calcium. Ces cellules ont été initialement traitées avec les carcinogènes N-méthyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) ou 7,12-diméthylbenz[a]anthracène (DMBA), puis exposées au 12-O-tétradécanoylphorbol-13-acétate (TPA). La résistance à la différenciation terminale a été évaluée en augmentant les niveaux de calcium dans le milieu de culture à 1,2 mM, ce qui permet sélectivement la croissance des cellules transformées alors que les cellules normales subissent généralement une différenciation terminale et meurent.

La lignée cellulaire MCA-3D présente une morphologie épithéliale et forme des colonies bien définies en culture. L'analyse ultrastructurale révèle que les cellules MCA-3D contiennent des filaments de kératine et des desmosomes, ce qui indique leur origine épithéliale et suggère le maintien d'un certain degré de différenciation kératinocytaire normale. Cependant, l'abondance exacte de ces structures peut varier d'une sous-population à l'autre au sein de la lignée.

La tumorigénicité des cellules MCA-3D a été testée par injection sous-cutanée dans des nouveau-nés syngéniques Balb/c. Les résultats indiquent que cette lignée n'est pas tumorigène, même après une culture prolongée dans des conditions de calcium élevé. En outre, les cellules MCA-3D ne se développent pas dans la gélose molle, ce qui confirme leur phénotype non malin. Les analyses biochimiques de l'activité gamma glutamyl transpeptidase (GGT) et de l'activité transglutaminase ont montré que les cellules MCA-3D sont négatives pour la GGT, et que leur activité transglutaminase n'est pas en corrélation avec le potentiel tumorigène, ce qui confirme leur classification comme non tumorigènes.

Dans l'ensemble, la lignée cellulaire MCA-3D sert de modèle pour l'étude des premiers stades de la cancérogenèse et des facteurs qui influencent la progression des lésions prénéoplasiques vers des tumeurs entièrement malignes.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie