MCA-3D

Dòng tế bào MCA-3D được phân lập từ các văn hóa biểu bì chuột nguyên phát có khả năng kháng lại sự biệt hóa cuối cùng do canxi gây ra. Các tế bào này ban đầu được xử lý bằng các chất gây ung thư N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) hoặc 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA), sau đó được tiếp xúc với 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). Khả năng kháng lại quá trình biệt hóa cuối cùng được đánh giá bằng cách tăng nồng độ canxi trong môi trường nuôi cấy lên 1,2 mM, điều này cho phép các tế bào biến đổi phát triển một cách chọn lọc trong khi các tế bào bình thường thường trải qua quá trình biệt hóa cuối cùng và chết.

Dòng tế bào MCA-3D có hình thái biểu mô và tạo thành các cụm tế bào rõ ràng trong nuôi cấy. Phân tích siêu cấu trúc cho thấy tế bào MCA-3D chứa các sợi keratin và desmosome, cho thấy nguồn gốc biểu mô của chúng và gợi ý việc duy trì một mức độ phân hóa keratinocyte bình thường. Tuy nhiên, số lượng chính xác của các cấu trúc này có thể thay đổi giữa các quần thể con trong dòng tế bào.

Tế bào MCA-3D đã được kiểm tra khả năng gây u bằng cách tiêm dưới da vào chuột Balb/c đồng gen, kết quả cho thấy dòng tế bào này không gây u, ngay cả sau khi nuôi cấy kéo dài trong điều kiện canxi cao. Ngoài ra, các tế bào MCA-3D không phát triển trong agar mềm, càng củng cố thêm tính chất không ác tính của chúng. Các xét nghiệm sinh hóa về hoạt động của gamma glutamyl transpeptidase (GGT) và transglutaminase cho thấy các tế bào MCA-3D âm tính với GGT, và hoạt động transglutaminase của chúng không liên quan đến tiềm năng gây ung thư, phù hợp với phân loại không gây ung thư của chúng.

Tổng thể, dòng tế bào MCA-3D là một mô hình để nghiên cứu các giai đoạn sớm của quá trình ung thư hóa và các yếu tố ảnh hưởng đến sự tiến triển từ các tổn thương tiền ung thư đến các khối u ác tính hoàn toàn.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.