MCA-3D

MCA-3D-cellinjen härrör från primära epidermala kulturer från mus som uppvisar resistens mot kalciuminducerad terminal differentiering. Dessa celler behandlades initialt med de carcinogena ämnena N-metyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) eller 7,12-dimetylbenz[a]antracen (DMBA) och exponerades därefter för 12-O-tetradekanoylforbol-13-acetat (TPA). Motståndet mot terminal differentiering utvärderades genom att höja kalciumnivåerna i odlingsmediet till 1,2 mM, vilket selektivt möjliggör tillväxt av transformerade celler medan normala celler vanligtvis genomgår terminal differentiering och dör.

Cellinjen MCA-3D uppvisar en epitelial morfologi och bildar väldefinierade kolonier i odling. Ultrastrukturell analys visar att MCA-3D-cellerna innehåller keratinfilament och desmosomer, vilket är ett tecken på deras epiteliala ursprung och tyder på att en viss grad av normal keratinocytdifferentiering bibehålls. Den exakta förekomsten av dessa strukturer kan dock variera mellan subpopulationer inom linjen.

MCA-3D-celler har testats för tumörframkallande förmåga genom subkutan injektion i syngena Balb/c-nonater, och resultaten tyder på att denna cellinje inte är tumörframkallande, inte ens efter långvarig odling under förhållanden med hög kalciumhalt. Dessutom växer inte MCA-3D-cellerna i mjuk agar, vilket ytterligare stöder deras icke-maligna fenotyp. Biokemiska analyser av gammaglutamyltranspeptidas (GGT)-aktivitet och transglutaminasaktivitet har visat att MCA-3D-cellerna är negativa för GGT, och att deras transglutaminasaktivitet inte korrelerar med tumörframkallande potential, vilket överensstämmer med deras klassificering som icke-tumörframkallande.

Sammantaget fungerar MCA-3D-cellinjen som en modell för att studera de tidiga stadierna av carcinogenes och de faktorer som påverkar utvecklingen från preneoplastiska lesioner till fullt maligna tumörer.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring