MCA-3D

Buněčná linie MCA-3D je odvozena z primárních myších epidermálních kultur, které vykazují odolnost vůči vápníkem indukované terminální diferenciaci. Tyto buňky byly nejprve ošetřeny karcinogeny N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidinem (MNNG) nebo 7,12-dimethylbenz[a]anthracenem (DMBA) a následně vystaveny působení 12-O-tetradekanoylforbol-13-acetátu (TPA). Odolnost vůči terminální diferenciaci byla hodnocena zvýšením hladiny vápníku v kultivačním médiu na 1,2 mM, což selektivně umožňuje růst transformovaných buněk, zatímco normální buňky obvykle podléhají terminální diferenciaci a smrti.

Buněčná linie MCA-3D vykazuje epitelovou morfologii a v kultuře tvoří dobře definované kolonie. Ultrastrukturální analýza ukazuje, že buňky MCA-3D obsahují keratinová vlákna a desmosomy, které svědčí o jejich epiteliálním původu a naznačují zachování určitého stupně normální keratinocytární diferenciace. Přesné množství těchto struktur se však může u jednotlivých subpopulací v rámci linie lišit.

Buňky MCA-3D byly testovány na tumorigenitu subkutánní injekcí syngenním novorozencům Balb/c, přičemž výsledky ukázaly, že tato linie není tumorigenní ani po dlouhodobé kultivaci v podmínkách s vysokým obsahem vápníku. Buňky MCA-3D navíc nerostou v měkkém agaru, což dále podporuje jejich nenádorový fenotyp. Biochemické testy aktivity gama glutamyl transpeptidázy (GGT) a transglutaminázy ukázaly, že buňky MCA-3D jsou negativní na GGT a jejich transglutaminázová aktivita nekoreluje s nádorovým potenciálem, což odpovídá jejich nenádorové klasifikaci.

Celkově lze říci, že buněčná linie MCA-3D slouží jako model pro studium časných stadií karcinogeneze a faktorů, které ovlivňují přechod od preneoplastických lézí k plně maligním nádorům.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení