MCA-3D

Клітинну лінію MCA-3D отримано з первинних культур епідермісу миші, які демонструють стійкість до кальцій-індукованої термінальної диференціації. Ці клітини спочатку обробляли канцерогенами N-метил-N'-нітро-N-нітрозогуанідином (MNNG) або 7,12-диметилбенз[a]антраценом (DMBA), а потім піддавали впливу 12-O-тетрадеканоїлфорбол-13-ацетату (TPA). Стійкість до термінальної диференціації оцінювали шляхом підвищення рівня кальцію в культуральному середовищі до 1,2 мМ, що вибірково забезпечує ріст трансформованих клітин, тоді як нормальні клітини зазвичай зазнають термінальної диференціації та загибелі.

Клітинна лінія MCA-3D має епітеліальну морфологію і утворює чітко окреслені колонії в культурі. Ультраструктурний аналіз показує, що клітини MCA-3D містять кератинові філаменти і десмосоми, які вказують на їх епітеліальне походження і припускають збереження певного ступеня нормальної диференціації кератиноцитів. Однак, точна кількість цих структур може варіювати між субпопуляціями в межах лінії.

Клітини MCA-3D були протестовані на пухлиногенність шляхом підшкірної ін'єкції синтетичним новонародженим Balb/c. Результати показали, що ця лінія не є пухлиногенною, навіть після тривалого культивування в умовах високого вмісту кальцію. Крім того, клітини MCA-3D не ростуть у м'якому агарі, що додатково підтверджує їхній незлоякісний фенотип. Біохімічні аналізи на активність гамма-глутамілтранспептидази (GGT) і трансглутамінази показали, що клітини MCA-3D є негативними до GGT, а їхня трансглутаміназна активність не корелює з пухлинним потенціалом, що узгоджується з їхньою непухлинною класифікацією.

Загалом, клітинна лінія MCA-3D слугує моделлю для вивчення ранніх стадій канцерогенезу та факторів, що впливають на прогресію від переднеопластичних утворень до повністю злоякісних пухлин.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>