MCA-3D

MCA-3D šūnu līnija ir iegūta no primārajām peļu epidermas kultūrām, kas ir izturīgas pret kalcija izraisītu terminālo diferenciāciju. Šīs šūnas sākotnēji tika apstrādātas ar kancerogēniem N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidīnu (MNNG) vai 7,12-dimetilbenz[a]antracēnu (DMBA) un pēc tam pakļautas 12-O-tetradekanoilforbol-13-acetāta (TPA) iedarbībai. Izturība pret terminālo diferenciāciju tika novērtēta, paaugstinot kalcija līmeni barotnē līdz 1,2 mM, kas selektīvi ļauj augt transformētām šūnām, kamēr normālas šūnas parasti iziet terminālo diferenciāciju un iet bojā.

MCA-3D šūnu līnijai ir epitēlija morfoloģija, un kultūrā tā veido labi definētas kolonijas. Ultrastrukturālā analīze atklāj, ka MCA-3D šūnās ir keratīna pavedieni un desmosomas, kas norāda uz to epitēlija izcelsmi un liecina par normālas keratinocītu diferenciācijas saglabāšanu. Tomēr precīzs šo struktūru daudzums dažādās līnijas subpopulācijās var atšķirties.

MCA-3D šūnas ir pārbaudītas attiecībā uz tumorogēniskumu, zemādas injekcijas veidā injicējot singēniskiem Balb/c jaundzimušajiem, un rezultāti liecina, ka šī līnija nav tumorogēniska pat pēc ilgstošas kultivēšanas augsta kalcija satura apstākļos. Turklāt MCA-3D šūnas neaug mīkstā agārā, kas vēl vairāk apstiprina to nemaligno fenomenu. Bioķīmiskie gamma glutamiltranspeptidāzes (GGT) aktivitātes un transglutamināzes aktivitātes testi parādīja, ka MCA-3D šūnu GGT ir negatīva, un to transglutamināzes aktivitāte nav saistīta ar audzēja potenciālu, kas atbilst to netumorizējošai klasifikācijai.

Kopumā MCA-3D šūnu līnija kalpo kā modelis kanceroģenēzes agrīno stadiju un faktoru, kas ietekmē pāreju no preneoplastiskiem bojājumiem uz pilnībā ļaundabīgiem audzējiem, izpētei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu