MCA-3D

MCA-3D ląstelių linija gaunama iš pirminių pelių epidermio kultūrų, kurios pasižymi atsparumu kalcio sukeltai terminalinei diferenciacijai. Iš pradžių šios ląstelės buvo apdorotos kancerogenais N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinu (MNNG) arba 7,12-dimetilbenz[a]antracenu (DMBA), o vėliau veikiamos 12-O-tetradekanoilforbol-13-acetatu (TPA). Atsparumas terminalinei diferenciacijai buvo įvertintas kultūros terpėje padidinus kalcio kiekį iki 1,2 mM, kuris selektyviai leidžia augti transformuotoms ląstelėms, o normalios ląstelės paprastai patiria terminalinę diferenciaciją ir žūsta.

MCA-3D ląstelių linija pasižymi epitelio morfologija ir kultūroje sudaro gerai apibrėžtas kolonijas. Ultrastruktūrinė analizė rodo, kad MCA-3D ląstelėse yra keratino gijų ir desmosomų, o tai rodo jų epitelinę kilmę ir leidžia manyti, kad jos išlaiko tam tikrą normalios keratinocitų diferenciacijos laipsnį. Tačiau tikslus šių struktūrų gausumas gali skirtis įvairiose linijos subpopuliacijose.

MCA-3D ląstelės buvo ištirtos dėl navikiškumo poodine injekcija į sinogeninius Balb/c naujagimius, o rezultatai parodė, kad ši linija nėra navikiška, net ir po ilgo auginimo didelio kalcio kiekio sąlygomis. Be to, MCA-3D ląstelės neauga minkštame agare, o tai dar labiau patvirtina jų nepiktybinį fenotipą. Biocheminiai gama glutamiltranspeptidazės (GGT) ir transglutaminazės aktyvumo tyrimai parodė, kad MCA-3D ląstelės neigiamai veikia GGT, o jų transglutaminazės aktyvumas nesusijęs su navikiniu potencialu, o tai atitinka jų netumorigeniškumo klasifikaciją.

Apskritai MCA-3D ląstelių linija yra ankstyvųjų kancerogenezės stadijų ir veiksnių, turinčių įtakos perėjimui nuo preneoplastinių pakitimų iki visiškai piktybinių navikų, tyrimo modelis.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime