MCA-3D

MCA-3D hücre hattı, kalsiyumla indüklenen terminal farklılaşmaya direnç gösteren birincil fare epidermal kültürlerinden türetilmiştir. Bu hücreler başlangıçta karsinojen N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) veya 7,12-dimetilbenz[a]antrasen (DMBA) ile muamele edilmiş ve ardından 12-O-tetradekanoilphorbol-13-asetata (TPA) maruz bırakılmıştır. Terminal farklılaşmaya karşı direnç, kültür ortamındaki kalsiyum seviyelerinin 1,2 mM'ye yükseltilmesiyle değerlendirilmiştir; bu, normal hücreler tipik olarak terminal farklılaşma ve ölüme maruz kalırken seçici olarak dönüştürülmüş hücrelerin büyümesine izin verir.

MCA-3D hücre hattı epitelyal bir morfoloji sergiler ve kültürde iyi tanımlanmış koloniler oluşturur. Ultrastrüktürel analiz, MCA-3D hücrelerinin epitelyal kökenlerinin göstergesi olan ve bir dereceye kadar normal keratinosit farklılaşmasının sürdürüldüğünü düşündüren keratin filamentleri ve desmozomlar içerdiğini ortaya koymaktadır. Bununla birlikte, bu yapıların tam bolluğu hat içindeki alt popülasyonlar arasında değişebilir.

MCA-3D hücreleri sinjenik Balb/c yenidoğanlara subkutan enjeksiyon yoluyla tümörijeniklik açısından test edilmiş ve sonuçlar bu hattın yüksek kalsiyum koşullarında uzun süreli kültürden sonra bile tümörijenik olmadığını göstermiştir. Ayrıca, MCA-3D hücreleri yumuşak agarda büyümeyerek malign olmayan fenotiplerini daha da desteklemektedir. Gama glutamil transpeptidaz (GGT) aktivitesi ve transglutaminaz aktivitesi için yapılan biyokimyasal testler, MCA-3D hücrelerinin GGT için negatif olduğunu ve transglutaminaz aktivitelerinin tümörijenik olmayan sınıflandırmalarıyla uyumlu olarak tümörijenik potansiyel ile ilişkili olmadığını göstermiştir.

Genel olarak, MCA-3D hücre hattı, karsinogenezin erken aşamalarını ve preneoplastik lezyonlardan tamamen malign tümörlere ilerlemeyi etkileyen faktörleri incelemek için bir model görevi görmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın