Skip to content
MCA-3D
Tissue
עור
Synonyms
MCA3D, MCa3D, MCA/3D, MCA 3D

Documents

MCA-3D

Cell line · Product number 400437

The MCA-3D cell line is derived from primary mouse epidermal cultures that exhibit resistance to calcium-induced terminal differentiation. These cells wer...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MCA-3D נגזר מתרבויות אפידרמיס עכבריות ראשוניות המפגינות עמידות בפני התמיינות סופית הנגרמת על ידי סידן. תאים אלה טופלו בתחילה בחומרים מסרטנים N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) או 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA), ולאחר מכן נחשפו ל-12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). העמידות בפני הבחנה סופית הוערכה על ידי העלאת רמות הסידן במדיום התרבית ל-1.2 mM, מה שמאפשר באופן סלקטיבי את צמיחתם של תאים שעברו שינוי, בעוד שתאים נורמליים עוברים בדרך כלל הבחנה סופית ומוות.

קו התאים MCA-3D מציג מורפולוגיה אפיתלית ויוצר מושבות מוגדרות היטב בתרבית. ניתוח אולטרא-מבני מגלה שתאי MCA-3D מכילים סיבי קרטין ודסמוזומים, המעידים על מקורם האפיתלי ומרמזים על שמירה על מידה מסוימת של התמיינות נורמלית של קרטינוציטים. עם זאת, השפע המדויק של מבנים אלה יכול להשתנות בין תת-אוכלוסיות בתוך הקו.

תאי MCA-3D נבדקו על ידי הזרקה תת-עורית לתינוקות Balb/c סינגניים, והתוצאות מצביעות על כך שקו זה אינו גורם לגידולים, גם לאחר תרבית ממושכת בתנאים של ריכוז סידן גבוה. בנוסף, תאי MCA-3D אינם גדלים באגר רך, מה שמחזק עוד יותר את הפנוטיפ הלא ממאיר שלהם. בדיקות ביוכימיות לפעילות גמא גלוטמיל טרנספפטידאז (GGT) ופעילות טרנסגלוטמינאז הראו שתאי MCA-3D שליליים ל-GGT, ופעילות הטרנסגלוטמינאז שלהם אינה מתואמת עם פוטנציאל סרטני, בהתאם לסיווגם כלא סרטניים.

בסך הכל, קו התאים MCA-3D משמש מודל לחקר השלבים המוקדמים של קרצינוגנזה והגורמים המשפיעים על ההתקדמות מנגעים טרום-נאופלסטיים לגידולים ממאירים לחלוטין.

Tissue
עור
Synonyms
  • MCA3D
  • MCa3D
  • MCA/3D
  • MCA 3D

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
קרטינוציט

04Identifiers

Citation
MCA-3D (מספר קטלוגי Cytion 400437)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5797

05Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
TrypLE אקספרס
Subculturing
הסר את המדיום ושטוף את התאים הדבוקים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלחות תרבית תאים T75). הוסף TrypleExpress (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל צלחת תרבית תאים T75), יש לכסות את יריעת התאים לחלוטין. דגיר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 15-20 דקות. השרו את התאים בזהירות במדיום (10 מ"ל), סובבו בצנטריפוגה במשך 5 דקות ב-300xg, השרו את התאים במדיום טרי והעבירו אותם לצלחות חדשות המכילות מדיום טרי.
Seeding density
0.5 עד 1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c