MCA-3D
Cell line · Product number 400437
The MCA-3D cell line is derived from primary mouse epidermal cultures that exhibit resistance to calcium-induced terminal differentiation. These cells wer...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים MCA-3D נגזר מתרבויות אפידרמיס עכבריות ראשוניות המפגינות עמידות בפני התמיינות סופית הנגרמת על ידי סידן. תאים אלה טופלו בתחילה בחומרים מסרטנים N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) או 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA), ולאחר מכן נחשפו ל-12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). העמידות בפני הבחנה סופית הוערכה על ידי העלאת רמות הסידן במדיום התרבית ל-1.2 mM, מה שמאפשר באופן סלקטיבי את צמיחתם של תאים שעברו שינוי, בעוד שתאים נורמליים עוברים בדרך כלל הבחנה סופית ומוות.
קו התאים MCA-3D מציג מורפולוגיה אפיתלית ויוצר מושבות מוגדרות היטב בתרבית. ניתוח אולטרא-מבני מגלה שתאי MCA-3D מכילים סיבי קרטין ודסמוזומים, המעידים על מקורם האפיתלי ומרמזים על שמירה על מידה מסוימת של התמיינות נורמלית של קרטינוציטים. עם זאת, השפע המדויק של מבנים אלה יכול להשתנות בין תת-אוכלוסיות בתוך הקו.
תאי MCA-3D נבדקו על ידי הזרקה תת-עורית לתינוקות Balb/c סינגניים, והתוצאות מצביעות על כך שקו זה אינו גורם לגידולים, גם לאחר תרבית ממושכת בתנאים של ריכוז סידן גבוה. בנוסף, תאי MCA-3D אינם גדלים באגר רך, מה שמחזק עוד יותר את הפנוטיפ הלא ממאיר שלהם. בדיקות ביוכימיות לפעילות גמא גלוטמיל טרנספפטידאז (GGT) ופעילות טרנסגלוטמינאז הראו שתאי MCA-3D שליליים ל-GGT, ופעילות הטרנסגלוטמינאז שלהם אינה מתואמת עם פוטנציאל סרטני, בהתאם לסיווגם כלא סרטניים.
בסך הכל, קו התאים MCA-3D משמש מודל לחקר השלבים המוקדמים של קרצינוגנזה והגורמים המשפיעים על ההתקדמות מנגעים טרום-נאופלסטיים לגידולים ממאירים לחלוטין.
- Tissue
- עור
- Synonyms
- MCA3D
- MCa3D
- MCA/3D
- MCA 3D
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- קרטינוציט
04Identifiers
- Citation
- MCA-3D (מספר קטלוגי Cytion 400437)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5797
05Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- TrypLE אקספרס
- Subculturing
- הסר את המדיום ושטוף את התאים הדבוקים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלחות תרבית תאים T75). הוסף TrypleExpress (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל צלחת תרבית תאים T75), יש לכסות את יריעת התאים לחלוטין. דגיר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 15-20 דקות. השרו את התאים בזהירות במדיום (10 מ"ל), סובבו בצנטריפוגה במשך 5 דקות ב-300xg, השרו את התאים במדיום טרי והעבירו אותם לצלחות חדשות המכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 0.5 עד 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Disclaimer
- התאים שלנו מיועדים אך ורק למטרות מחקר במעבדה במבחנה, ואינם מיועדים לשימוש קליני או אבחוני, ולא מיועדים לטיפול בבני אדם או לשימוש וטרינרי. על המשתמשים להקפיד על כל ההנחיות והתקנות החלות על טיפול ושימוש בתאים אלה בסביבת מחקר.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
