MCA-3D

Az MCA-3D sejtvonal elsődleges egér epidermális kultúrákból származik, amelyek rezisztenciát mutatnak a kalcium által indukált terminális differenciálódással szemben. Ezeket a sejteket kezdetben N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidin (MNNG) vagy 7,12-dimetilbenz[a]antracén (DMBA) karcinogénnel kezelték, majd 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetát (TPA) expozíciónak tették ki. A terminális differenciálódással szembeni ellenállást a táptalaj kalciumszintjének 1,2 mM-ra történő emelésével vizsgáltuk, ami szelektíven lehetővé teszi a transzformált sejtek növekedését, míg a normál sejtek jellemzően terminális differenciálódáson és elhaláson mennek keresztül.

Az MCA-3D sejtvonal epiteliális morfológiát mutat, és jól definiált kolóniákat képez a kultúrában. Az ultrastrukturális elemzés azt mutatja, hogy az MCA-3D sejtek keratin filamentumokat és deszmoszómákat tartalmaznak, amelyek epiteliális eredetükre utalnak, és a normál keratinocita differenciáció bizonyos fokú fenntartására utalnak. E struktúrák pontos mennyisége azonban a vonalon belüli szubpopulációk között változhat.

Az MCA-3D sejteket tumorigenitásra vizsgálták szingénikus Balb/c újszülöttek szubkután injekciózásával, és az eredmények azt mutatták, hogy ez a vonal nem tumorigenikus, még magas kalciumtartalmú körülmények között történő hosszan tartó tenyésztés után sem. Ezenkívül az MCA-3D sejtek nem növekednek lágy agarban, ami tovább erősíti nem malignus fenotípusukat. A gamma-glutamil-transzpeptidáz (GGT) és transzglutamináz aktivitás biokémiai vizsgálata azt mutatta, hogy az MCA-3D sejtek negatívak a GGT-re, és transzglutamináz aktivitásuk nem korrelál a tumorigén potenciállal, ami összhangban van a nem tumorigén besorolásukkal.

Összességében az MCA-3D sejtvonal modellként szolgál a karcinogenezis korai szakaszainak és a preneoplasztikus elváltozásoktól a teljesen rosszindulatú daganatokig tartó progressziót befolyásoló tényezők tanulmányozására.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban