MCA-3D

Bunková línia MCA-3D je odvodená z primárnych epidermálnych kultúr myší, ktoré vykazujú odolnosť voči terminálnej diferenciácii indukovanej vápnikom. Tieto bunky boli najprv ošetrené karcinogénmi N-metyl-N'-nitro-N-nitrozoguanidínom (MNNG) alebo 7,12-dimetylbenz[a]antracénom (DMBA) a následne vystavené pôsobeniu 12-O-tetradekanoylforbol-13-acetátu (TPA). Odolnosť voči terminálnej diferenciácii sa hodnotila zvýšením hladiny vápnika v kultivačnom médiu na 1,2 mM, čo selektívne umožňuje rast transformovaných buniek, zatiaľ čo normálne bunky zvyčajne podliehajú terminálnej diferenciácii a smrti.

Bunková línia MCA-3D vykazuje epitelovú morfológiu a v kultúre vytvára dobre definované kolónie. Ultraštrukturálna analýza ukazuje, že bunky MCA-3D obsahujú keratínové vlákna a desmozómy, ktoré svedčia o ich epiteliálnom pôvode a naznačujú zachovanie určitého stupňa normálnej keratinocytovej diferenciácie. Presný výskyt týchto štruktúr sa však môže líšiť medzi jednotlivými subpopuláciami v rámci línie.

Bunky MCA-3D boli testované na nádorovú aktivitu subkutánnou injekciou syngénnym novorodencom Balb/c, pričom výsledky naznačujú, že táto línia nie je nádorovo aktívna ani po dlhodobej kultivácii v podmienkach s vysokým obsahom vápnika. Okrem toho bunky MCA-3D nerastú v mäkkom agare, čo ďalej podporuje ich nenádorový fenotyp. Biochemické testy na aktivitu gama glutamyl transpeptidázy (GGT) a transglutaminázovú aktivitu ukázali, že bunky MCA-3D sú negatívne na GGT a ich transglutaminázová aktivita nekoreluje s nádorovým potenciálom, čo zodpovedá ich nenádorovej klasifikácii.

Celkovo slúži bunková línia MCA-3D ako model na štúdium skorých štádií karcinogenézy a faktorov, ktoré ovplyvňujú prechod od preneoplastických lézií k plne malígnym nádorom.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke