MCA-3D

Клетъчната линия MCA-3D е получена от първични миши епидермални култури, които проявяват устойчивост към индуцираната от калций терминална диференциация. Тези клетки първоначално са третирани с канцерогените N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (MNNG) или 7,12-диметилбенз[а]антрацен (DMBA), а впоследствие са изложени на 12-O-тетрадеканоилфорбол-13-ацетат (TPA). Устойчивостта към терминална диференциация е оценена чрез повишаване на нивата на калций в хранителната среда до 1,2 mM, което селективно позволява растежа на трансформираните клетки, докато нормалните клетки обикновено претърпяват терминална диференциация и смърт.

Клетъчната линия MCA-3D показва епителна морфология и образува добре дефинирани колонии в културата. Ултраструктурният анализ разкрива, че клетките MCA-3D съдържат кератинови нишки и дезмозоми, които са показателни за техния епителен произход и предполагат поддържане на известна степен на нормална кератиноцитна диференциация. Точното количество на тези структури обаче може да варира между субпопулациите в рамките на линията.

Клетките MCA-3D са тествани за туморогенност чрез подкожно инжектиране в сингенни новородени Balb/c, като резултатите показват, че тази линия не е туморогенна, дори след продължително култивиране в условия на високо съдържание на калций. Освен това MCA-3D клетките не растат в мек агар, което допълнително потвърждава техния немалигнен фенотип. Биохимичните тестове за активност на гама-глутамил транспептидаза (GGT) и трансглутаминазна активност показват, че клетките MCA-3D са отрицателни за GGT, а тяхната трансглутаминазна активност не корелира с туморен потенциал, което съответства на класификацията им като нетуморогенни.

Като цяло клетъчната линия MCA-3D служи като модел за изучаване на ранните етапи на канцерогенезата и факторите, които влияят върху прогресията от пренеопластични лезии до напълно злокачествени тумори.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация