MCA-3D

La linea cellulare MCA-3D deriva da colture epidermiche primarie di topo che mostrano resistenza alla differenziazione terminale indotta dal calcio. Queste cellule sono state inizialmente trattate con gli agenti cancerogeni N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) o 7,12-dimetilbenz[a]antracene (DMBA) e successivamente esposte al 12-O-tetradecanoilforbolo-13-acetato (TPA). La resistenza alla differenziazione terminale è stata valutata elevando i livelli di calcio nel terreno di coltura a 1,2 mM, che consente selettivamente la crescita delle cellule trasformate, mentre le cellule normali vanno tipicamente incontro a differenziazione terminale e morte.

La linea cellulare MCA-3D mostra una morfologia epiteliale e forma colonie ben definite in coltura. L'analisi ultrastrutturale rivela che le cellule MCA-3D contengono filamenti di cheratina e desmosomi, che sono indicativi della loro origine epiteliale e suggeriscono il mantenimento di un certo grado di differenziazione normale dei cheratinociti. Tuttavia, l'esatta abbondanza di queste strutture può variare tra le sottopopolazioni della linea.

Le cellule MCA-3D sono state sottoposte a test di tumorigenicità mediante iniezione sottocutanea in neonati Balb/c singenici, con risultati che indicano che questa linea non è tumorigenica, anche dopo una coltura prolungata in condizioni di calcio elevato. Inoltre, le cellule MCA-3D non crescono in soft agar, a ulteriore conferma del loro fenotipo non maligno. I test biochimici per l'attività della gamma glutamil transpeptidasi (GGT) e della transglutaminasi hanno dimostrato che le cellule MCA-3D sono negative per la GGT e la loro attività di transglutaminasi non è correlata al potenziale tumorigenico, allineandosi con la loro classificazione non tumorigenica.

Nel complesso, la linea cellulare MCA-3D serve come modello per studiare le prime fasi della carcinogenesi e i fattori che influenzano la progressione da lesioni preneoplastiche a tumori completamente maligni.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia