MCA-3D

يُشتق خط خلايا MCA-3D من مزارع البشرة الأولية للفأر التي تُظهر مقاومة للتمايز الطرفي الناجم عن الكالسيوم. عولجت هذه الخلايا في البداية بالمواد المسرطنة N-methyl-N'-nitro-N-n-nitrosoguanidine (MNNG) أو 7,12-ثنائي ميثيل بنز[أ] أنثراسين (DMBA)، ثم عولجت بعد ذلك ب 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). تم تقييم مقاومة التمايز الطرفي عن طريق رفع مستويات الكالسيوم في وسط المستنبت إلى 1.2 ملي متر، وهو ما يسمح بشكل انتقائي بنمو الخلايا المتحولة بينما تخضع الخلايا الطبيعية عادةً للتمايز الطرفي والموت.

يُظهر خط الخلايا MCA-3D مورفولوجيا طلائية ويشكل مستعمرات واضحة المعالم في المزرعة. ويكشف تحليل البنية فوق الهيكلية أن خلايا MCA-3D تحتوي على خيوط كيراتينية وخلايا ديسموسوماتية تدل على أصلها الظهاري وتشير إلى الحفاظ على درجة معينة من التمايز الطبيعي للخلايا الكيراتينية. ومع ذلك، يمكن أن تختلف الوفرة الدقيقة لهذه الهياكل بين المجموعات السكانية الفرعية داخل الخط.

وقد تم اختبار خلايا MCA-3D للتأكد من عدم تولد الأورام عن طريق الحقن تحت الجلد في خلايا حديثي الولادة من فصيلة Balb/c، حيث تشير النتائج إلى أن هذا الخط غير متولد للأورام حتى بعد الاستزراع المطول في ظروف عالية الكالسيوم. وبالإضافة إلى ذلك، لا تنمو خلايا MCA-3D في أجار لين، مما يدعم نمطها الظاهري غير الخبيث. أظهرت الفحوصات الكيميائية الحيوية لنشاط الغلوتاميل ترانسبوربتيداز (GGT) ونشاط الترانسبلوتاميناز أن خلايا MCA-3D سلبية بالنسبة إلى الغلوتاميل ترانسبلوتاميناز، ولا يرتبط نشاط الترانسبلوتاميناز الخاص بها بإمكانية تولد الأورام، مما يتماشى مع تصنيفها غير الورمي.

بشكل عام، يُستخدم خط خلايا MCA-3D كنموذج لدراسة المراحل المبكرة من التسرطن والعوامل التي تؤثر على التطور من الآفات ما قبل الورمية إلى الأورام الخبيثة بالكامل.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان