MCA-3D

De MCA-3D cellijn is afgeleid van primaire muizenepidermale culturen die resistentie vertonen tegen calciumgeïnduceerde terminale differentiatie. Deze cellen werden aanvankelijk behandeld met de kankerverwekkende stoffen N-methyl-N'-nitro-Nitrosoguanidine (MNNG) of 7,12-dimethylbenz[a]anthraceen (DMBA) en vervolgens blootgesteld aan 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). De resistentie tegen terminale differentiatie werd beoordeeld door het calciumniveau in het kweekmedium te verhogen tot 1,2 mM, wat selectief de groei van getransformeerde cellen mogelijk maakt terwijl normale cellen gewoonlijk terminale differentiatie en dood ondergaan.

De MCA-3D cellijn vertoont een epitheliale morfologie en vormt goed gedefinieerde kolonies in cultuur. Ultrastructurele analyse laat zien dat MCA-3D cellen keratinefilamenten en desmosomen bevatten, die indicatief zijn voor hun epitheliale oorsprong en wijzen op het behoud van een zekere mate van normale keratinocytendifferentiatie. De exacte overvloed van deze structuren kan echter variëren tussen subpopulaties binnen de lijn.

MCA-3D cellen zijn getest op tumorigeniciteit door subcutane injectie in syngene Balb/c neonaten, met resultaten die aangeven dat deze lijn niet tumorigenic is, zelfs na langdurige kweek in hoge calciumcondities. Bovendien groeien de MCA-3D cellen niet in zachte agar, wat hun niet-kwaadaardige fenotype verder ondersteunt. Biochemische testen voor gamma glutamyl transpeptidase (GGT) activiteit en transglutaminase activiteit hebben aangetoond dat MCA-3D cellen negatief zijn voor GGT en dat hun transglutaminase activiteit niet correleert met tumorigene potentie, wat overeenkomt met hun niet-tumorigene classificatie.

In het algemeen dient de MCA-3D cellijn als model voor het bestuderen van de vroege stadia van carcinogenese en de factoren die de progressie van preneoplastische letsels naar volledig kwaadaardige tumoren beïnvloeden.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring