MCA-3D

MCA-3D-cellelinjen er avledet fra primære epidermalkulturer fra mus som utviser resistens mot kalsiumindusert terminal differensiering. Disse cellene ble først behandlet med de kreftfremkallende stoffene N-metyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) eller 7,12-dimetylbenz[a]antracen (DMBA), og deretter eksponert for 12-O-tetradekanoylforbol-13-acetat (TPA). Motstanden mot terminal differensiering ble vurdert ved å øke kalsiumnivået i dyrkingsmediet til 1,2 mM, noe som selektivt tillater vekst av transformerte celler, mens normale celler vanligvis gjennomgår terminal differensiering og dør.

MCA-3D-cellelinjen har en epitelial morfologi og danner veldefinerte kolonier i kultur. Ultrastrukturelle analyser viser at MCA-3D-celler inneholder keratinfilamenter og desmosomer, noe som tyder på at de har epitelial opprinnelse og opprettholder en viss grad av normal keratinocyttdifferensiering. Den nøyaktige forekomsten av disse strukturene kan imidlertid variere mellom subpopulasjoner innenfor linjen.

MCA-3D-celler har blitt testet for tumorigenisitet ved subkutan injeksjon i syngene Balb/c nyfødte, og resultatene tyder på at denne cellelinjen ikke er tumorigenisk, selv etter langvarig dyrking under høye kalsiumbetingelser. I tillegg vokser ikke MCA-3D-cellene i myk agar, noe som ytterligere underbygger deres ikke-maligne fenotype. Biokjemiske analyser av gammaglutamyltranspeptidase (GGT)-aktivitet og transglutaminaseaktivitet har vist at MCA-3D-cellene er negative for GGT, og at transglutaminaseaktiviteten ikke korrelerer med tumorogent potensial, noe som samsvarer med deres ikke-tumorogene klassifisering.

MCA-3D-cellelinjen fungerer som en modell for å studere de tidlige stadiene av karsinogenese og de faktorene som påvirker utviklingen fra preneoplastiske lesjoner til fullt maligne svulster.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring