MCA-3D

เซลล์ไลน์ MCA-3D มีที่มาจากวัฒนธรรมผิวหนังชั้นนอกของหนูที่เป็นต้นแบบซึ่งแสดงการต้านทานต่อการเปลี่ยนแปลงขั้นสุดท้ายที่เกิดจากแคลเซียมเซลล์เหล่านี้ได้รับการบำบัดเบื้องต้นด้วยสารก่อมะเร็ง N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) หรือ 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) และต่อมาถูกสัมผัสกับ 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)การต้านทานต่อการเปลี่ยนแปลงขั้นสุดท้ายถูกประเมินโดยการเพิ่มระดับแคลเซียมในอาหารเพาะเลี้ยงให้สูงถึง 1.2 มิลลิโมลาร์ ซึ่งช่วยให้เซลล์ที่เปลี่ยนแปลงสามารถเจริญเติบโตได้เฉพาะ ในขณะที่เซลล์ปกติมักจะเกิดการเปลี่ยนแปลงขั้นสุดท้ายและตายไป

เซลล์ไลน์ MCA-3D แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิวและก่อตัวเป็นโคโลนีที่มีขอบเขตชัดเจนในวัฒนธรรม การวิเคราะห์โครงสร้างระดับจุลภาคเผยให้เห็นว่าเซลล์ MCA-3D มีเส้นใยเคอราตินและเดสโมโซม ซึ่งเป็นลักษณะที่บ่งบอกถึงต้นกำเนิดจากเยื่อบุผิวและบ่งชี้ถึงการคงอยู่ของการแยกแยะเซลล์เคอราติโนไซต์ในระดับปกติบางส่วน อย่างไรก็ตาม ปริมาณที่แน่นอนของโครงสร้างเหล่านี้อาจแตกต่างกันไปในแต่ละประชากรย่อยภายในไลน์

เซลล์ MCA-3D ได้รับการทดสอบความสามารถในการก่อเนื้องอกโดยการฉีดใต้ผิวหนังในทารกแรกเกิดสายพันธุ์ Balb/c ที่มีความเหมือนกันทางพันธุกรรม ผลการทดสอบแสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์นี้ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก แม้จะเพาะเลี้ยงในสภาวะที่มีแคลเซียมสูงเป็นเวลานานก็ตามนอกจากนี้ เซลล์ MCA-3D ไม่สามารถเจริญเติบโตในวุ้นอ่อนได้ ซึ่งเป็นการสนับสนุนเพิ่มเติมถึงลักษณะที่ไม่เป็นมะเร็งของพวกมัน การทดสอบทางชีวเคมีสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์แกมมา-กลูตามิล ทรานส์เพปทิเดส (GGT) และกิจกรรมของเอนไซม์ทรานส์กลูตามิเนส ได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ MCA-3D มีค่า GGT เป็นลบ และกิจกรรมของเอนไซม์ทรานส์กลูตามิเนสของพวกมันไม่มีความสัมพันธ์กับศักยภาพในการก่อเนื้องอก ซึ่งสอดคล้องกับการจัดประเภทที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกของพวกมัน

โดยรวมแล้ว สายเซลล์ MCA-3D ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาขั้นตอนเริ่มต้นของการเกิดมะเร็งและปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อการพัฒนาจากรอยโรคก่อนมะเร็งไปสู่เนื้องอกที่เป็นมะเร็งเต็มรูปแบบ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.