MCA-3D

MCA-3D rakuliin on saadud hiire primaarsetest epidermiaalkultuuridest, mis on resistentsed kaltsiumist põhjustatud terminaalse diferentseerumise suhtes. Neid rakke töödeldi algselt kantserogeenidega N-metüül-N'-nitro-N-nitrosoguanidiin (MNNG) või 7,12-dimetüülbens[a]antratseen (DMBA) ning seejärel eksponeeriti neid 12-O-tetradekanoüülforbool-13-atsetaadiga (TPA). Terminaalse diferentseerumise resistentsust hinnati, tõstes kaltsiumitaseme kultuurikeskkonnas 1,2 mM-ni, mis võimaldab selektiivselt transformeeritud rakkude kasvu, samas kui normaalsed rakud tavaliselt läbivad terminaalse diferentseerumise ja surevad.

MCA-3D rakuliinil on epiteeli morfoloogia ja see moodustab kultuuris hästi määratletud kolooniad. Ultrastruktuuriline analüüs näitab, et MCA-3D rakud sisaldavad keratiinifilamente ja desmosome, mis viitavad nende epiteliaalse päritolule ja viitavad teatud määral normaalse keratinotsüütide diferentseerumise säilimisele. Nende struktuuride täpne arvukus võib siiski liinisiseselt subpopulatsiooniti erineda.

MCA-3D rakke on testitud kasvajaohtlikkuse suhtes süngeensetele Balb/c vastsündinutele nahaaluse süstimise teel, kusjuures tulemused näitasid, et see liin ei ole kasvajaohtlik isegi pärast pikaajalist kasvatamist kõrge kaltsiumisisaldusega tingimustes. Lisaks sellele ei kasva MCA-3D rakud pehmel agaril, mis toetab veelgi nende mittemaliigset fenotüüpi. Biokeemilised testid gammaglutamüültranspeptidaasi (GGT) aktiivsuse ja transglutaminaasi aktiivsuse määramiseks on näidanud, et MCA-3D rakud on GGT suhtes negatiivsed ja nende transglutaminaasi aktiivsus ei korreleeru tuumorigeense potentsiaaliga, mis vastab nende mittetuumorigeensele klassifikatsioonile.

Üldiselt on MCA-3D rakuliin mudeliks, mille abil saab uurida kantserogeneesi varajasi etappe ja tegureid, mis mõjutavad eelsoodumuse edenemist täielikult pahaloomulisteks kasvajateks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest