MCA-3D

Die MCA-3D-Zelllinie stammt aus primären Epidermis-Kulturen der Maus, die eine Resistenz gegen die durch Kalzium induzierte terminale Differenzierung aufweisen. Diese Zellen wurden zunächst mit den Karzinogenen N-Methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) oder 7,12-Dimethylbenz[a]anthracen (DMBA) behandelt und anschließend mit 12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetat (TPA) behandelt. Die Resistenz gegen die terminale Differenzierung wurde durch Erhöhung des Kalziumspiegels im Kulturmedium auf 1,2 mM ermittelt, was selektiv das Wachstum der transformierten Zellen ermöglicht, während normale Zellen in der Regel eine terminale Differenzierung durchlaufen und absterben.

Die MCA-3D-Zelllinie weist eine epitheliale Morphologie auf und bildet in der Kultur gut definierte Kolonien. Ultrastrukturelle Analysen zeigen, dass MCA-3D-Zellen Keratinfilamente und Desmosomen enthalten, was auf ihren epithelialen Ursprung hinweist und auf die Aufrechterhaltung eines gewissen Maßes an normaler Keratinozytendifferenzierung hindeutet. Das genaue Vorkommen dieser Strukturen kann jedoch je nach Subpopulation innerhalb der Linie variieren.

MCA-3D-Zellen wurden durch subkutane Injektion in syngene Balb/c-Neugeborene auf ihre Tumorigenität getestet. Die Ergebnisse zeigen, dass diese Linie selbst nach längerer Kultur unter hohen Kalziumbedingungen nicht tumorigen ist. Darüber hinaus wachsen die MCA-3D-Zellen nicht in weichem Agar, was ihren nicht-malignen Phänotyp weiter unterstützt. Biochemische Tests auf Gamma-Glutamyl-Transpeptidase (GGT)-Aktivität und Transglutaminase-Aktivität haben gezeigt, dass MCA-3D-Zellen negativ für GGT sind und ihre Transglutaminase-Aktivität nicht mit dem tumorigenen Potenzial korreliert, was mit ihrer nicht-tumorigenen Klassifizierung übereinstimmt.

Insgesamt dient die MCA-3D-Zelllinie als Modell für die Untersuchung der frühen Stadien der Karzinogenese und der Faktoren, die das Fortschreiten von präneoplastischen Läsionen zu vollständig bösartigen Tumoren beeinflussen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung