MCA-3D

MCA-3D-solulinja on peräisin hiiren primaarisista epidermisviljelmistä, joilla on resistenssi kalsiumin aiheuttamaa terminaalista erilaistumista vastaan. Näitä soluja käsiteltiin aluksi karsinogeeneillä N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiini (MNNG) tai 7,12-dimetyylibents[a]antraseeni (DMBA), minkä jälkeen ne altistettiin 12-O-tetradekanyyliforboli-13-asetaatille (TPA). Terminaalisen erilaistumisen vastustuskykyä arvioitiin nostamalla kalsiumtasot kasvatusmediassa 1,2 mM:iin, mikä sallii valikoivasti transformoituneiden solujen kasvun, kun taas normaalit solut tyypillisesti erilaistuvat terminaalisesti ja kuolevat.

MCA-3D-solulinjalla on epiteelimorfologia ja se muodostaa hyvin määriteltyjä pesäkkeitä viljelyssä. Ultrastruktuurianalyysi paljastaa, että MCA-3D-solut sisältävät keratiinifilamentteja ja desmosomeja, jotka viittaavat niiden epiteeliperäisyyteen ja viittaavat siihen, että ne säilyttävät jonkinasteisen normaalin keratinosyyttien erilaistumisen. Näiden rakenteiden täsmällinen runsaus voi kuitenkin vaihdella linjan sisällä olevien osapopulaatioiden välillä.

MCA-3D-soluja on testattu kasvainten muodostumisen varalta injektoimalla ne ihon alle syngeenisiin Balb/c-alkuisiin vastasyntyneisiin, ja tulokset osoittavat, että tämä linja ei ole kasvainten muodostumista edistävä, vaikka sitä olisi viljelty pitkään korkeassa kalsiumpitoisessa tilassa. Lisäksi MCA-3D-solut eivät kasva pehmeässä agarissa, mikä tukee entisestään niiden ei-malignia fenotyyppiä. Biokemialliset määritykset gammaglutamyylitranspeptidaasi- (GGT) ja transglutaminaasiaktiivisuudesta ovat osoittaneet, että MCA-3D-solut ovat negatiivisia GGT:n suhteen, eikä niiden transglutaminaasiaktiivisuus korreloi tuumorigeenisen potentiaalin kanssa, mikä vastaa niiden ei-tuumorigeenistä luokitusta.

Kaiken kaikkiaan MCA-3D-solulinja toimii mallina karsinogeneesin varhaisvaiheiden ja niiden tekijöiden tutkimiseen, jotka vaikuttavat etenemiseen preneoplastisista vaurioista täysin pahanlaatuisiin kasvaimiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa