MCA-3D

MCA-3D-cellelinjen stammer fra primære epidermale kulturer fra mus, der udviser resistens over for calcium-induceret terminal differentiering. Disse celler blev først behandlet med de kræftfremkaldende stoffer N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) eller 7,12-dimethylbenz[a]anthracen (DMBA) og derefter udsat for 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetat (TPA). Modstanden mod terminal differentiering blev vurderet ved at hæve calciumniveauet i kulturmediet til 1,2 mM, hvilket selektivt giver mulighed for vækst af transformerede celler, mens normale celler typisk gennemgår terminal differentiering og død.

MCA-3D-cellelinjen har en epitelial morfologi og danner veldefinerede kolonier i kulturen. Ultrastrukturelle analyser viser, at MCA-3D-cellerne indeholder keratinfilamenter og desmosomer, som er tegn på deres epitheliale oprindelse og tyder på, at de opretholder en vis grad af normal keratinocytdifferentiering. Den nøjagtige mængde af disse strukturer kan dog variere mellem subpopulationer inden for linjen.

MCA-3D-celler er blevet testet for tumorigenicitet ved subkutan injektion i syngene Balb/c-nonater, og resultaterne viser, at denne linje ikke er tumorigen, selv efter langvarig dyrkning under høje calciumforhold. Desuden vokser MCA-3D-cellerne ikke i blød agar, hvilket yderligere understøtter deres ikke-maligne fænotype. Biokemiske analyser for gamma-glutamyl-transpeptidase (GGT)-aktivitet og transglutaminase-aktivitet har vist, at MCA-3D-celler er negative for GGT, og at deres transglutaminase-aktivitet ikke korrelerer med tumorigenisk potentiale, hvilket stemmer overens med deres ikke-tumorigeniske klassificering.

Samlet set fungerer MCA-3D-cellelinjen som en model til at studere de tidlige stadier af kræftfremkaldelse og de faktorer, der påvirker udviklingen fra præneoplastiske læsioner til fuldt maligne tumorer.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring