MCA-3D

Η κυτταρική σειρά MCA-3D προέρχεται από πρωτογενείς επιδερμικές καλλιέργειες ποντικών που παρουσιάζουν αντίσταση στην επαγόμενη από ασβέστιο τελική διαφοροποίηση. Τα κύτταρα αυτά υποβλήθηκαν αρχικά σε επεξεργασία με τα καρκινογόνα N-μεθυλ-N'-νιτρο-N-νιτροζογουανιδίνη (MNNG) ή 7,12-διμεθυλοβενζ[α]ανθρακένιο (DMBA) και στη συνέχεια εκτέθηκαν σε 12-O-τετραδεκανοϋλο-φορβολ-13-οξικό άλας (TPA). Η αντίσταση στην τελική διαφοροποίηση αξιολογήθηκε με την αύξηση των επιπέδων ασβεστίου στο μέσο καλλιέργειας σε 1,2 mM, το οποίο επιτρέπει επιλεκτικά την ανάπτυξη των μετασχηματισμένων κυττάρων, ενώ τα φυσιολογικά κύτταρα τυπικά υφίστανται τελική διαφοροποίηση και θάνατο.

Η κυτταρική σειρά MCA-3D εμφανίζει επιθηλιακή μορφολογία και σχηματίζει καλά καθορισμένες αποικίες στην καλλιέργεια. Η ανάλυση της υπερδομής αποκαλύπτει ότι τα κύτταρα MCA-3D περιέχουν νημάτια κερατίνης και δεσμοσώματα, τα οποία είναι ενδεικτικά της επιθηλιακής τους προέλευσης και υποδηλώνουν τη διατήρηση κάποιου βαθμού φυσιολογικής διαφοροποίησης των κερατινοκυττάρων. Ωστόσο, η ακριβής αφθονία αυτών των δομών μπορεί να διαφέρει μεταξύ των υποπληθυσμών εντός της σειράς.

Τα κύτταρα MCA-3D έχουν δοκιμαστεί για καρκινικότητα με υποδόρια έγχυση σε συγγενή νεογνά Balb/c, με αποτελέσματα που δείχνουν ότι η γραμμή αυτή δεν είναι καρκινική, ακόμη και μετά από παρατεταμένη καλλιέργεια σε συνθήκες υψηλού ασβεστίου. Επιπλέον, τα κύτταρα MCA-3D δεν αναπτύσσονται σε μαλακό άγαρ, υποστηρίζοντας περαιτέρω τον μη κακοήθη φαινότυπό τους. Οι βιοχημικές αναλύσεις για τη δραστικότητα της γ-γλουταμυλικής τρανσπεπτιδάσης (GGT) και τη δραστικότητα της τρανσγλουταμινάσης έδειξαν ότι τα κύτταρα MCA-3D είναι αρνητικά για τη GGT και η δραστικότητα της τρανσγλουταμινάσης δεν συσχετίζεται με το καρκινικό δυναμικό, ευθυγραμμιζόμενα με τη μη καρκινική ταξινόμησή τους.

Συνολικά, η κυτταρική σειρά MCA-3D χρησιμεύει ως μοντέλο για τη μελέτη των πρώιμων σταδίων της καρκινογένεσης και των παραγόντων που επηρεάζουν την εξέλιξη από τις προνεοπλασματικές αλλοιώσεις σε πλήρως κακοήθεις όγκους.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης