MCA-3D

MCA-3D細胞株は、カルシウム誘導性終末分化に対する抵抗性を示すマウス表皮初代培養細胞から誘導された。これらの細胞は、最初にN-メチル-N'-ニトロ-N-ニトロソグアニジン（MNNG）または7,12-ジメチルベンズ[a]アントラセン（DMBA）で処理され、その後12-O-テトラデカノイルホルボール-13-アセテート（TPA）に暴露された。培養液中のカルシウム濃度を1.2mMまで上昇させることで、正常細胞は通常終末分化して死滅するのに対して、形質転換細胞は選択的に増殖できるようになり、終末分化に対する抵抗性が評価された。

MCA-3D細胞株は上皮性形態を示し、培養中では明瞭なコロニーを形成する。超微細構造解析から、MCA-3D細胞はケラチンフィラメントとデスモソームを含んでいることが明らかになった。これは上皮由来であることを示し、ある程度の正常なケラチノサイト分化が維持されていることを示唆している。しかしながら、これらの構造の正確な存在量は、細胞株内の亜集団によって異なる可能性がある。

MCA-3D細胞は、同系遺伝子Balb/c新生児に皮下注射して腫瘍形成性を試験した結果、この株は高カルシウム条件下で長期間培養しても腫瘍形成性がないことが示された。さらに、MCA-3D細胞は軟寒天培地では増殖せず、非悪性表現型をさらに裏付けている。ガンマ・グルタミル・トランスペプチダーゼ（GGT）活性とトランスグルタミナーゼ活性の生化学的アッセイにより、MCA-3D細胞はGGT陰性であり、トランスグルタミナーゼ活性は腫瘍形成能と相関しないことが示された。

全体として、MCA-3D細胞株は発癌の初期段階と、前腫瘍性病変から完全な悪性腫瘍への進行に影響する因子を研究するモデルとして役立つ。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。