- Tissu
- Poumon
- Maladie
- Carcinome pulmonaire à petites cellules
- Site métastatique
- Épanchement pleural
- Synonymes
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Documents
NCI-H82
Cell line · Référence du produit 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Personnalisation / Recommandations
- NCI-H82Cell line€430.00
01Informations générales
- Description
- La lignée cellulaire NCI-H82 a été dérivée par A.F. Gazdar et ses collaborateurs en 1978 à partir du liquide pleural d'un patient atteint d'un cancer du poumon à petites cellules. La morphologie de la tumeur d'origine n'était pas caractéristique du cancer à petites cellules du poumon. La lignée est une variante biochimique et morphologique du SCLC qui exprime l'énolase spécifique des neurones et l'isoenzyme cérébrale de la créatine kinase. Elle ne présente pas de niveaux détectables de L-DOPA décarboxylase ou de bombésine. Les cellules produisent un ARNm p53 de taille anormale (3,7 kb). Les séquences d'ADN C-myc sont amplifiées environ 25 fois et l'ARN c-myc est multiplié par 24 par rapport aux cellules normales. Les cellules expriment des récepteurs fonctionnels d'ANP, mais le traitement à l'ANP ne modifie pas leur mode de croissance. Les cellules présentent une coloration positive pour les neurofilaments et la vimentine. Les ARNm v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras et c-raf 1 sont exprimés.
- Tissu
- Poumon
- Maladie
- Carcinome pulmonaire à petites cellules
- Site métastatique
- Épanchement pleural
- Synonymes
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Homme
- Propriétés de croissance
- Suspension
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Tumorigène
- Oui, forme des tumeurs transplantables avec une histologie SCLC non-typique chez des souris nude
- Caryotype
- Il s'agit d'une lignée cellulaire humaine quasi triploïde. Le nombre modal de chromosomes est de 58, avec un taux de polyploïdie de 3 %. Chaque cellule possède deux copies d'un chromosome X normal. Le chromosome Y n'a pas été détecté dans les préparations Q banded.
04Identifiants
- Référence
- NCI-H82 (numéro de catalogue Cytion 300442)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Expression et sensibilité
- Récepteurs exprimés
- Récepteur du facteur de croissance analogue à l'insuline II (IGF II), peptide natriurétique auriculaire (ANP)
- Expression des protéines
- P53 positif
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produit de fréquence du phénotype = 0,0082
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Repiquage
- Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- 41 ans
- Origine ethnique
- Caucasien
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui
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