Gå til innholdet
NCI-H82
Vev
Lunge
Sykdom
Småcellet lungekarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumenter

NCI-H82

Cell line · Produktnummer 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
NCI-H82-cellelinjen ble avledet av A.F. Gazdar og medarbeidere i 1978 fra pleuravæske fra en pasient med småcellet lungekreft. Morfologien til den opprinnelige svulsten var ikke karakteristisk for SCLC. Linjen er en biokjemisk og morfologisk variant av SCLC som uttrykker nevronspesifikk enolase og hjerne-isoenzymet kreatinkinase. Den har ikke påvisbare nivåer av L-DOPA-dekarboksylase eller bombesin. Cellene produserer et p53-mRNA av unormal størrelse (3,7 kb). C-myc-DNA-sekvenser amplifiseres omtrent 25 ganger, og det er en 24 ganger økning i c-myc-RNA i forhold til normale celler. Cellene uttrykker funksjonelle ANP-reseptorer, men behandling med ANP endrer ikke vekstmønsteret. Cellene farges positivt for nevrofilamenter og vimentin. Det er uttrykk av v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras og c-raf 1 mRNA.
Vev
Lunge
Sykdom
Småcellet lungekarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, danner transplanterbare svulster med ikke-typisk SCLC-histologi i nakenmus
Karyotype
Dette er en nær triploid human cellelinje. Det modale kromosomantallet er 58, med en forekomst på 44 % og polyploidi på 3 %. Hver celle hadde to kopier av et normalt x-kromosom. Y-kromosomet ble ikke påvist i Q-båndpreparater.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H82 (Cytion katalognummer 300442)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Insulinlignende vekstfaktor II-reseptor (IGF II), atrialt natriuretisk peptid (ANP)
Proteinekspresjon
P53-positiv
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotypefrekvensprodukt = 0,0082

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
41 år
Etnisitet
Kaukasisk