- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma pulmonar de pequenas células
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Documentos
NCI-H82
Cell line · Número do produto 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Personalização / Recomendações
- NCI-H82Cell line€430.00
01Informações gerais
- Descrição
- A linha celular NCI-H82 foi obtida por A.F. Gazdar e colaboradores em 1978 a partir do líquido pleural de um doente com cancro do pulmão de pequenas células. A morfologia do tumor original não era caraterística do SCLC. A linha é uma variante bioquímica e morfológica do CPPC que exprime a enolase específica dos neurónios e a isoenzima cerebral da creatina quinase. Não apresenta níveis detectáveis de L-DOPA descarboxilase ou de bombesina. As células produzem um mRNA p53 de tamanho anormal (3,7 kb). As sequências de ADN de C-myc são amplificadas cerca de 25 vezes e há um aumento de 24 vezes no ARN de c-myc em relação às células normais. As células expressam receptores de ANP funcionais, mas o tratamento com ANP não altera o seu padrão de crescimento. As células coram positivamente para neurofilamentos e vimentina. Há expressão dos mRNAs v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras e c-raf 1.
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma pulmonar de pequenas células
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Suspensão
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, forma tumores transplantáveis com histologia de CPPC não típica em ratinhos nus
- Cariótipo
- Trata-se de uma linha celular humana quase triploide. O número modal de cromossomas é 58, ocorrendo em 44% com poliploidia em 3%. Cada célula tinha duas cópias de um cromossoma X normal. O cromossoma Y não foi detectado em preparações com bandas Q.
04Identificadores
- Referência
- NCI-H82 (número de catálogo Cytion 300442)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Expressão e suscetibilidade
- Receptores expressos
- Recetor do fator de crescimento semelhante à insulina II (IGF II), péptido natriurético atrial (ANP)
- Expressão proteica
- P53 positivo
- Isoenzimas
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produto de frequência fenotípica = 0,0082
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Subcultura
- Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 41 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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