İçeriğe atla
NCI-H82
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

NCI-H82

Cell line · Ürün numarası 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
NCI-H82 hücre hattı 1978 yılında A.F. Gazdar ve arkadaşları tarafından küçük hücreli akciğer kanseri olan bir hastanın plevral sıvısından elde edilmiştir. Orijinal tümörün morfolojisi KHAK için karakteristik değildi. Bu hat, nöron spesifik enolaz ve kreatin kinazın beyin izoenzimini eksprese eden SCLC'nin biyokimyasal ve morfolojik bir varyantıdır. Tespit edilebilir düzeyde L-DOPA dekarboksilaz veya bombesin içermez. Hücreler anormal büyüklükte bir p53 mRNA (3,7 kb) üretir. C-myc DNA dizileri yaklaşık 25 kat çoğalır ve normal hücrelere göre c-myc RNA'da 24 kat artış vardır. Hücrelerin işlevsel ANP reseptörlerini ifade ettiği bildirilmiştir, ancak ANP ile tedavi büyüme modellerini değiştirmez. Hücreler nörofilamentler ve vimentin için pozitif boyanmaktadır. V-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras ve c-raf 1 mRNA'larının ekspresyonu vardır.
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde tipik olmayan KHAK histolojisine sahip nakledilebilir tümörler oluşturur
Karyotip
Bu, triploide yakın bir insan hücre hattıdır. Modal kromozom sayısı 58'dir ve %44 oranında poliploidi ile %3 oranında görülür. Her hücre normal x kromozomunun iki kopyasına sahiptir. Q bantlı preparatlarda Y kromozomu tespit edilmemiştir.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H82 (Cytion katalog numarası 300442)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
İnsülin benzeri büyüme faktörü II reseptörü (IGF II), atriyal natriüretik peptit (ANP)
Protein ekspresyonu
P53 pozitif
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotip Frekans Çarpımı = 0,0082

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
41 yıl
Etnik köken
Kafkas