Preskoči na vsebino
NCI-H82
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom pljuč
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumenti

NCI-H82

Cell line · Številka izdelka 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis
Celično linijo NCI-H82 so leta 1978 A. F. Gazdar in sodelavci pridobili iz plevralne tekočine bolnika z drobnoceličnim rakom pljuč. Morfologija prvotnega tumorja ni bila značilna za SCLC. Linija je biokemična in morfološka različica SCLC, ki izraža nevronsko specifično enolazo in možganski izoencim kreatin kinaze. V njej ni zaznavnih ravni dekarboksilaze L-DOPA ali bombesina. Celice proizvajajo nenormalno veliko mRNA p53 (3,7 kb). C-myc DNK zaporedja se pomnožijo približno 25-krat, c-myc RNK pa se v primerjavi z normalnimi celicami poveča za 24-krat. Celice izražajo funkcionalne receptorje za ANP, vendar zdravljenje z ANP ne spremeni njihovega vzorca rasti. Celice se pozitivno obarvajo za nevrofilamente in vimentin. Izražajo mRNA v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras in c-raf 1.
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom pljuč
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, tvori presadljive tumorje z netipično histologijo SCLC pri golih miših
Kariotip
To je skoraj triploidna človeška celična linija. Modalno število kromosomov je 58, pojavlja se v 44 %, poliploidija pa v 3 %. Vsaka celica ima dve kopiji normalnega kromosoma x. Kromosoma Y v preparatih s trakovi Q niso odkrili.

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H82 (kataloška številka Cytion 300442)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Receptor za inzulinu podoben rastni faktor II (IGF II), atrijski natriuretični peptid (ANP)
Ekspresija beljakovin
P53 pozitiven
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, produkt fenotipske frekvence = 0,0082

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 5 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 1 x 106 celic/ml.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
41 let
Etnična pripadnost
Kavkaški