- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Småcellscarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Pleurautgjutning
- Synonymer
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Dokument
NCI-H82
Cell line · Produktnummer 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Anpassning / Rekommendationer
- NCI-H82Cell line€430.00
01Allmän information
- Beskrivning
- Cellinjen NCI-H82 framställdes av A.F. Gazdar och medarbetare 1978 från pleuravätska från en patient med småcellig lungcancer. Morfologin hos den ursprungliga tumören var inte karakteristisk för SCLC. The Line är en biokemisk och morfologisk variant av SCLC som uttrycker neuronspecifikt enolas och hjärnisoenzymet av kreatinkinas. Den har inte detekterbara nivåer av L-DOPA-dekarboxylas eller bombesin. Cellerna producerar ett onormalt stort p53-mRNA (3,7 kb). C-myc DNA-sekvenser amplifieras cirka 25 gånger och det finns en 24-faldig ökning av c-myc RNA jämfört med normala celler. Cellerna rapporteras uttrycka funktionella ANP-receptorer, men behandling med ANP förändrar inte deras tillväxtmönster. Cellerna färgas positivt för neurofilament och vimentin. Det finns uttryck av v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras och c-raf 1 mRNA.
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Småcellscarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Pleurautgjutning
- Synonymer
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Upphängning
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Tumörframkallande
- Ja, bildar transplanterbara tumörer med icke-typisk SCLC-histologi i nakenmöss
- Karyotyp
- Detta är en nära triploid human cellinje. Det modala kromosomantalet är 58, vilket förekommer i 44% med polyploidi i 3%. Varje cell hade två kopior av en normal x-kromosom. Y-kromosomen kunde inte påvisas i Q-bandade preparat.
04Identifierare
- Källa
- NCI-H82 (Cytion katalognummer 300442)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- Receptor för insulinliknande tillväxtfaktor II (IGF II), natriuretisk peptid i förmaket (ANP)
- Proteinexpression
- P53-positiv
- Isoenzymer
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, fenotypfrekvensprodukt = 0,0082
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Vidareodling
- Underhåll odlingarna genom att regelbundet tillsätta eller byta ut odlingsmediet. Starta odlingarna med en densitet på 5 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen inom intervallet 3 x 105 till 1 x 106 celler/ml för optimal tillväxt.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 41 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
