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NCI-H82
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma pulmonar de células pequeñas
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Documentos

NCI-H82

Cell line · Número de producto 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

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Personalización / Recomendaciones

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01Información general

Descripción
La línea celular NCI-H82 fue derivada por A.F. Gazdar y asociados en 1978 a partir del líquido pleural de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La morfología del tumor original no era característica del CPCP. Se trata de una variante bioquímica y morfológica del SCLC que expresa enolasa neuronal específica y la isoenzima cerebral de la creatina quinasa. No presenta niveles detectables de L-DOPA descarboxilasa ni de bombesina. Las células producen un ARNm p53 de tamaño anormal (3,7 kb). Las secuencias de ADN de C-myc se amplifican unas 25 veces, y hay un aumento de 24 veces en el ARN de c-myc en relación con las células normales. Las células expresan receptores ANP funcionales, pero el tratamiento con ANP no altera su patrón de crecimiento. Las células presentan tinción positiva para neurofilamentos y vimentina. Existe expresión de ARNm de v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras y c-raf 1.
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma pulmonar de células pequeñas
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, forma tumores transplantables con histología de CPCP no típico en ratones desnudos
Cariotipo
Se trata de una línea celular humana casi triploide. El número modal de cromosomas es 58, con un 44% de poliploidía y un 3% de poliploidía. Cada célula tenía dos copias de un cromosoma X normal. No se detectó el cromosoma Y en las preparaciones con bandas Q.

04Identificadores

Referencia
NCI-H82 (número de catálogo 300442 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Receptor del factor de crecimiento similar a la insulina II (IGF II), péptido natriurético auricular (ANP)
Expresión de proteínas
P53 positivo
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Frecuencia del fenotipo Producto = 0,0082

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo periódicamente el medio. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para un crecimiento óptimo.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
41 años
Origen étnico
Caucásico