Prejsť na obsah
NCI-H82
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm pľúc
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumenty

NCI-H82

Cell line · Číslo výrobku 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Bunkovú líniu NCI-H82 odvodili A. F. Gazdar a jeho spolupracovníci v roku 1978 z pleurálnej tekutiny pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Morfológia pôvodného nádoru nebola charakteristická pre SCLC. Táto línia je biochemickým a morfologickým variantom SCLC, ktorý exprimuje neurón špecifickú enolázu a mozgový izoenzým kreatínkinázy. Nemá zistiteľné hladiny L-DOPA dekarboxylázy ani bombesínu. Bunky produkujú abnormálnu veľkosť mRNA p53 (3,7 kb). Sekvencie DNA c-myc sú amplifikované približne 25-násobne a v porovnaní s normálnymi bunkami je 24-násobný nárast c-myc RNA. Bunky údajne exprimujú funkčné receptory ANP, ale liečba ANP nemení ich rastový model. Bunky sa pozitívne farbia na neurofilamenty a vimentín. Expresia mRNA v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras a c-raf 1.
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm pľúc
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, vytvára transplantovateľné nádory s netypickou histológiou SCLC u nahých myší
Karyotyp
Ide o takmer triploidnú ľudskú bunkovú líniu. Modálny počet chromozómov je 58, vyskytujú sa v 44 % s polyploidnosťou 3 %. Každá bunka mala dve kópie normálneho chromozómu x. Chromozóm Y sa v preparátoch s pásikmi Q nezistil.

04Identifikátory

Citácia
NCI-H82 (katalógové číslo Cytion 300442)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Receptor pre inzulínu podobný rastový faktor II (IGF II), atriálny natriuretický peptid (ANP)
Expresia proteínov
P53 pozitívny
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, produkt frekvencie fenotypu = 0,0082

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
41 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský