Tartalomra ugrás
NCI-H82
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumentumok

NCI-H82

Cell line · Termékszám 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Az NCI-H82 sejtvonalat A.F. Gazdar és munkatársai 1978-ban egy kissejtes tüdőrákban szenvedő beteg mellhártyájának folyadékából nyerték. Az eredeti tumor morfológiája nem volt jellemző az SCLC-re. A vonal az SCLC biokémiai és morfológiai változata, amely neuronspecifikus enolázt és a kreatin-kináz agyi izoenzimjét expresszálja. Nem mutatható ki az L-DOPA-dekarboxiláz és a bombesin szintje. A sejtek abnormális méretű p53 mRNS-t termelnek (3,7 kb). A c-myc DNS-szekvenciák körülbelül 25-szörösére amplifikálódnak, és a c-myc RNS 24-szeresére nő a normális sejtekhez képest. A jelentések szerint a sejtek funkcionális ANP-receptorokat expresszálnak, de az ANP-vel történő kezelés nem változtatja meg a növekedési mintázatukat. A sejtek pozitívan festődnek neurofilamentumokra és vimentinre. A v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras és c-raf 1 mRNS-ek kifejeződnek.
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, nem tipikus SCLC szövettanú, transzplantálható tumorokat képez meztelen egerekben
Kariotípus
Ez egy közel triploid emberi sejtvonal. A modális kromoszómaszám 58, amely 44%-ban fordul elő, a poliploidia aránya 3%. Minden sejtben két példányban volt egy normális x kromoszóma. Az Y kromoszómát nem mutatták ki a Q sávos preparátumokban.

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H82 (Cytion katalógusszám: 300442)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Inzulinszerű növekedési faktor II receptor (IGF II), pitvari natriuretikus peptid (ANP)
Fehérjeexpresszió
P53 pozitív
Izoenzimek
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotípus gyakorisági termék = 0,0082

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres hozzáadásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 3 x 105 és 1 x 106 sejt/ml közötti tartományban.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
41 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi