الانتقال إلى المحتوى
NCI-H82
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة في الرئة
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

المستندات

NCI-H82

Cell line · رقم المنتج 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تم اشتقاق خط الخلايا NCI-H82 من قبل أ. ف. غازدار وزملائه في عام 1978 من السائل الجنبي لمريض مصاب بسرطان الخلايا الصغيرة في الرئة. لم تكن مورفولوجية الورم الأصلي مميزة لسرطان الخلايا الصغيرة في الرئة. هذا الخط هو متغير كيميائي حيوي ومورفولوجي لسرطان الخلايا الصغيرة في الرئة الذي يعبر عن إنزيم الإنولاز المحدد للخلايا العصبية وإنزيم الدماغ المتساوي من الكرياتين كيناز. ولا يحتوي على مستويات يمكن اكتشافها من إنزيم L-DOPA decarboxylase أو بومبيسين. تنتج الخلايا الحمض النووي الريبي المرسال p53 بحجم غير طبيعي (3.7 كيلو بايت). يتم تضخيم تسلسل الحمض النووي c-myc بحوالي 25 ضعفًا، وهناك زيادة بمقدار 24 ضعفًا في الحمض النووي الريبي c-myc بالنسبة للخلايا الطبيعية. تم الإبلاغ عن أن الخلايا تُعبّر عن مستقبلات ANP الوظيفية، لكن العلاج ب ANP لا يُغيّر نمط نموها. تَصْبُغ الخلايا بصبغة إيجابية للخلايا العصبية والفيمينتين. هناك تعبير عن v-fes و v-fms و Ha-ras و Ki-ras و N-ras و c-raf 1 mRNAs.
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة في الرئة
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، تشكل أوراماً قابلة للزرع مع أنسجة غير نمطية للورم السرطاني الحلقي الشوكي في الفئران العارية
النمط الكروموسومي
هذا خط خلايا بشرية ثلاثية الصبغيات الصبغية تقريباً. يبلغ العدد النموذجي للكروموسوم 58، وتبلغ نسبة تعدد الصبغيات الصبغية 44% مع تعدد الصبغيات الصبغية بنسبة 3%. تحتوي كل خلية على نسختين من كروموسوم x الطبيعي. لم يتم الكشف عن كروموسوم Y في المستحضرات ذات النطاقات Q.

04المعرّفات

المرجع
NCI-H82 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300442)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1591

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
مستقبلات عامل النمو الشبيه بالأنسولين II (IGF II)، الببتيد الأذيني المدر للبول (ANP)
التعبير البروتيني
P53 إيجابي
الإيزوزيمات
G6PD، B، PGM1، 1-2، PGM3، 1-2، ES-D، 1، Me-2، 1، AK-1، 1، GLO-1، 1، GLO-1، 1، منتج تكرار النمط الظاهري = 0.0082

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
41 سنة
الأصل العرقي
قوقازي

قد تحتاج أيضًا إلى