Przejdź do treści
NCI-H82
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy płuca
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumenty

NCI-H82

Cell line · Numer produktu 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Linia komórkowa NCI-H82 została uzyskana przez A.F. Gazdara i współpracowników w 1978 roku z płynu opłucnowego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuca. Morfologia pierwotnego guza nie była charakterystyczna dla SCLC. Linia ta jest biochemicznym i morfologicznym wariantem SCLC, który wykazuje ekspresję enolazy swoistej dla neuronów i izoenzymu mózgowej kinazy kreatynowej. Nie ma wykrywalnych poziomów dekarboksylazy L-DOPA ani bombesiny. Komórki wytwarzają nieprawidłowej wielkości mRNA p53 (3,7 kb). Sekwencje DNA c-myc są amplifikowane około 25-krotnie, a RNA c-myc wzrasta 24-krotnie w stosunku do normalnych komórek. Komórki wykazują ekspresję funkcjonalnych receptorów ANP, ale leczenie ANP nie zmienia ich wzorca wzrostu. Komórki wybarwiają się pozytywnie na neurofilamenty i wimentynę. Występuje ekspresja mRNA v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras i c-raf 1.
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy płuca
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, tworzy przeszczepialne guzy o nietypowej histologii SCLC u nagich myszy
Karyotyp
Jest to prawie triploidalna ludzka linia komórkowa. Modalna liczba chromosomów wynosi 58, występując w 44% z poliploidią na poziomie 3%. Każda komórka posiadała dwie kopie normalnego chromosomu x. Chromosom Y nie został wykryty w preparatach z prążkami Q.

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H82 (numer katalogowy Cytion 300442)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Receptor insulinopodobnego czynnika wzrostu II (IGF II), przedsionkowy peptyd natriuretyczny (ANP)
Ekspresja białek
P53 dodatni
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, iloczyn częstości fenotypów = 0,0082

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Kultury należy utrzymywać poprzez okresowe dodawanie lub wymianę pożywki. Kultury należy rozpocząć od gęstości 5 x 105 komórek/ml i utrzymywać stężenie komórek w zakresie od 3 x 105 do 1 x 106 komórek/ml, aby zapewnić optymalny wzrost.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
41 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski