Pāriet uz saturu
NCI-H82
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu sīkšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumenti

NCI-H82

Cell line · Preces numurs 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
NCI-H82 šūnu līniju 1978. gadā ieguva A. F. Gazdars (A. F. Gazdar) un viņa līdzstrādnieki no pleiras šķidruma, kas iegūts no pacienta ar plaušu sīkšūnu vēzi. Sākotnējā audzēja morfoloģija nebija raksturīga SCLC. Šī līnija ir SCLC bioķīmiskais un morfoloģiskais variants, kas ekspresē neironiem specifisko enolāzi un smadzeņu kreatīnkināzes izoenzīmu. Tajā nav nosakāms L-DOPA dekarboksilāzes vai bombezīna līmenis. Šūnās veidojas nenormāla izmēra p53 mRNS (3,7 kb). C-myc DNS sekvences ir pastiprinātas aptuveni 25 reizes, un c-myc RNS ir 24 reizes lielāka salīdzinājumā ar normālām šūnām. Tiek ziņots, ka šūnas ekspresē funkcionālus ANP receptorus, bet ārstēšana ar ANP nemaina to augšanas modeli. Šūnās pozitīvi krāsojas neirofilamenti un vimentīns. Ir vērojama v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras un c-raf 1 mRNS ekspresija.
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu sīkšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, veido transplantējamus audzējus ar netipisku SCLC histoloģiju nude pelēm
Kariotips
Šī ir gandrīz triploīda cilvēka šūnu līnija. Modālais hromosomu skaits ir 58 hromosomas, kas sastopamas 44 % gadījumu, bet poliploīdijas līmenis ir 3 %. Katrai šūnai bija divas normālas x hromosomas kopijas. Y hromosomu Q joslu preparātos nekonstatēja.

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H82 (Cytion kataloga numurs 300442)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Insulīnam līdzīgā augšanas faktora II receptoru (IGF II), priekškambaru natriuretisko peptīdu (ANP)
Proteīnu ekspresija
P53 pozitīvs
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotipu biežuma produkts = 0,0082

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
41 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis