Skip to content
NCI-H82
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Documents

NCI-H82

Cell line · Product number 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description
เซลล์ไลน์ NCI-H82 ถูกพัฒนาโดย A.F. Gazdar และคณะในปี 1978 จากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเนื้องอกต้นกำเนิดไม่เหมือนกับ SCLC เซลล์ไลน์นี้เป็นสายพันธุ์ทางชีวเคมีและสัณฐานวิทยาของ SCLC ที่แสดงออกของเอนไซม์ neuron specific enolase และ isoenzyme ของ creatine kinase ในสมองไม่พบระดับของเอนไซม์ L-DOPA decarboxylase หรือ bombesin ในระดับที่สามารถตรวจวัดได้ เซลล์ผลิต mRNA ของ p53 ที่มีขนาดผิดปกติ (3.7 kb) ลำดับดีเอ็นเอของ C-myc ถูกขยายเพิ่มขึ้นประมาณ 25 เท่า และมีการเพิ่มขึ้นของ c-myc RNA ประมาณ 24 เท่าเมื่อเทียบกับเซลล์ปกติ มีรายงานว่าเซลล์เหล่านี้แสดงการออกฤทธิ์ของตัวรับ ANP แต่เมื่อได้รับการรักษาด้วย ANP ไม่พบการเปลี่ยนแปลงรูปแบบการเจริญเติบโตของเซลล์เซลล์มีการย้อมสีเป็นบวกสำหรับนิวโรฟิลามีนต์และวีเมนติน มีการแสดงออกของ v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras และ c-raf 1 mRNA
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่, ก่อให้เกิดเนื้องอกที่สามารถปลูกถ่ายได้ซึ่งมีลักษณะทางจุลทรรศน์ของ SCLC ที่ไม่ปกติในหนูเมาส์ที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน
Karyotype
นี่คือเซลล์ไลน์มนุษย์ที่เกือบเป็นไตรโซมี่ จำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอลคือ 58 เกิดขึ้นที่ 44% โดยมีพอลิพลอยดีที่ 3% แต่ละเซลล์มีโครโมโซม X ปกติสองชุด โครโมโซม Y ไม่ถูกตรวจพบในการเตรียมตัวอย่างแบบ Q banding

04Identifiers

Citation
NCI-H82 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300442)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ตัวรับอินซูลินไลค์โกรทแฟคเตอร์ II (IGF II), หัวใจห้องบนนาทริยูเรติกเปปไทด์ (ANP)
Protein expression
P53 เป็นบวก
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, ความถี่ของฟีโนไทป์ = 0.0082

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Subculturing
รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 5 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 3 x 105 ถึง 1 x 106 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่ดีที่สุด
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
41 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน