Ga naar de inhoud
NCI-H82
Weefsel
Long
Ziekte
Longkleincellig carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Documenten

NCI-H82

Cell line · Productnummer 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
De NCI-H82 cellijn werd in 1978 door A.F. Gazdar en medewerkers afgeleid uit het pleuravocht van een patiënt met kleincellige longkanker. De morfologie van de oorspronkelijke tumor was niet karakteristiek voor SCLC. De lijn is een biochemische en morfologische variant van SCLC die neuronspecifiek enolase en het hersenisoenzym creatinekinase tot expressie brengt. Er zijn geen detecteerbare niveaus van L-DOPA decarboxylase of bombesine. De cellen produceren een abnormaal groot p53-mRNA (3,7 kb). C-myc DNA-sequenties worden ongeveer 25 keer vergroot en er is een 24-voudige toename in c-myc RNA ten opzichte van normale cellen. De cellen brengen functionele ANP-receptoren tot expressie, maar behandeling met ANP verandert hun groeipatroon niet. De cellen zijn positief gekleurd voor neurofilamenten en vimentine. Er is expressie van v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras en c-raf 1 mRNAs.
Weefsel
Long
Ziekte
Longkleincellig carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, vormt transplanteerbare tumoren met niet-typische histologie van SCLC in naakte muizen
Karyotype
Dit is een bijna triploïde menselijke cellijn. Het modale chromosoomnummer is 58, voorkomend bij 44% met polyploïdie bij 3%. Elke cel had twee kopieën van een normaal x-chromosoom. Het Y-chromosoom werd niet gedetecteerd in Q-bandpreparaten.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H82 (Cytion catalogusnummer 300442)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Receptor voor insuline-achtige groeifactor II (IGF II), atriumnatriuretisch peptide (ANP)
Eiwit-expressie
P53-positief
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotype Frequentie Product = 0,0082

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
41 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch