- Tissue
- 肺部
- Disease
- 肺小细胞癌
- Metastatic site
- 胸腔积液
- Synonyms
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Documents
01General information
- Description
- NCI-H82 细胞系是 A.F. Gazdar 及其同事于 1978 年从一名肺小细胞癌患者的胸腔积液中提取的。原始肿瘤的形态不具有小细胞肺癌的特征。该细胞系是 SCLC 的生化和形态变异型，表达神经元特异性烯醇化酶和肌酸激酶的脑同工酶。它检测不到 L-DOPA 脱羧酶或蚕豆蛋白。细胞会产生异常大小的 p53 mRNA（3.7 kb）。与正常细胞相比，C-myc DNA 序列扩增了约 25 倍，c-myc RNA 增加了 24 倍。据报道，这些细胞表达功能性 ANP 受体，但用 ANP 处理不会改变它们的生长模式。细胞的神经丝杠和波形蛋白染色呈阳性。细胞表达 v-fes、v-fms、Ha-ras、Ki-ras、N-ras 和 c-raf 1 mRNA。
- Tissue
- 肺部
- Disease
- 肺小细胞癌
- Metastatic site
- 胸腔积液
- Synonyms
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是，在裸鼠体内形成具有非典型 SCLC 组织学的可移植肿瘤
- Karyotype
- 这是一种接近三倍体的人类细胞系。染色体的模数为 58，出现率为 44%，多倍体率为 3%。每个细胞都有两个正常 x 染色体的拷贝。在 Q 带制备物中未检测到 Y 染色体。
04Identifiers
- Citation
- NCI-H82（Cytion 目录号 300442）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- 胰岛素样生长因子 II 受体（IGF II）、心房钠尿肽（ANP）
- Protein expression
- P53 阳性
- Isoenzymes
- G6PD，B，PGM1，1-2，PGM3，1-2，ES-D，1，Me-2，1，AK-1，1，GLO-1，1，表型频率乘积 = 0.0082
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Subculturing
- 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为5×10⁵个细胞/毫升，并保持细胞浓度在3×10⁵至1×10⁶个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 41 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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