- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Karsinoma sel kecil paru-paru
- Lokasi metastasis
- Efusi pleura
- Sinonim
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Dokumen
NCI-H82
Cell line · Nomor produk 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Penyesuaian / Rekomendasi
- NCI-H82Cell line€430.00
01Informasi umum
- Deskripsi
- Garis sel NCI-H82 diturunkan oleh A.F. Gazdar dan rekan pada tahun 1978 dari cairan pleura pasien dengan kanker sel kecil pada paru-paru. Morfologi tumor asli tidak khas untuk SCLC. Garis ini adalah varian biokimia dan morfologi SCLC yang mengekspresikan enolase spesifik neuron dan isoenzim otak kreatin kinase. Ia tidak memiliki kadar L-DOPA dekarboksilase atau bombesin yang dapat dideteksi. Sel-sel menghasilkan mRNA p53 berukuran abnormal (3,7 kb). Sekuens DNA c-myc diamplifikasi sekitar 25 kali lipat, dan ada peningkatan 24 kali lipat pada c-myc RNA relatif terhadap sel normal. Sel-sel tersebut dilaporkan mengekspresikan reseptor ANP fungsional, tetapi pengobatan dengan ANP tidak mengubah pola pertumbuhannya. Sel-sel diwarnai secara positif untuk neurofilamen dan vimentin. Ada ekspresi v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras dan c-raf 1 mRNA.
- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Karsinoma sel kecil paru-paru
- Lokasi metastasis
- Efusi pleura
- Sinonim
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Penangguhan
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Tumorigenik
- Ya, membentuk tumor yang dapat ditransplantasikan dengan histologi SCLC yang tidak khas pada tikus telanjang
- Kariotipe
- Ini adalah garis sel manusia yang hampir triploid. Jumlah kromosom modal adalah 58, terjadi pada 44% dengan poliploidi sebesar 3%. Setiap sel memiliki dua salinan kromosom x normal. Kromosom Y tidak terdeteksi dalam sediaan berpita Q.
04Pengidentifikasi
- Referensi
- NCI-H82 (Nomor katalog Cytion 300442)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- Reseptor faktor pertumbuhan mirip insulin II (IGF II), peptida natriuretik atrium (ANP)
- Ekspresi protein
- P53 positif
- Isoenzim
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produk Frekuensi Fenotipe = 0,0082
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Perbanyakan sel
- Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 5 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 3 x 10⁵ hingga 1 x 10⁶ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 41 tahun
- Etnis
- Kaukasia
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
.jpg)
.jpg)
.jpg)
