Mine otse sisu juurde
NCI-H82
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Dokumendid

NCI-H82

Cell line · Toote number 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
NCI-H82 rakuliini tuletasid A.F. Gazdar ja kaaslased 1978. aastal ühe kopsuvähki põdeva patsiendi pleura vedelikust. Algse kasvaja morfoloogia ei olnud SCLC-le iseloomulik. See liin on SCLC biokeemiline ja morfoloogiline variant, mis ekspresseerib neuronispetsiifilist enolaasi ja aju kreatiinkinaasi isoensüümi. Selles ei ole L-DOPA dekarboksülaasi ega bombesiini tuvastatavat taset. Rakud toodavad ebanormaalse suurusega p53 mRNA-d (3,7 kb). C-myc DNA järjestused on umbes 25 korda võimendatud ja c-myc RNA on 24 korda suurenenud võrreldes normaalsete rakkudega. On teatatud, et rakud ekspresseerivad funktsionaalseid ANP retseptoreid, kuid ravi ANP-ga ei muuda nende kasvumustrit. Rakud värvuvad positiivselt neurofilamentide ja vimentiini suhtes. Ekspresseeruvad v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras ja c-raf 1 mRNAd.
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, moodustab nude hiirtel mittetüüpilise SCLC histoloogiaga transplanteeritavaid kasvajaid
Karyotüüp
See on peaaegu triploidne inimese rakuliin. Modaalne kromosoomide arv on 58, mis esineb 44% ulatuses, kusjuures polüploidsus on 3%. Igas rakus oli kaks koopiat normaalset x-kromosoomi. Y-kromosoomi ei tuvastatud Q-riba preparaatides.

04Tunnused

Viide
NCI-H82 (Cytioni katalooginumber 300442)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1591

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Insuliinilaadse kasvufaktori II retseptor (IGF II), atriaalne natriureetiline peptiid (ANP)
Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, fenotüübi sageduse toode = 0,0082

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
41 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia