Премини към съдържанието
NCI-H82
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином на белия дроб
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc

Документи

NCI-H82

Cell line · Номер на продукта 300442

The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание
Клетъчната линия NCI-H82 е получена от A.F. Gazdar и сътрудници през 1978 г. от плевралната течност на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Морфологията на първоначалния тумор не е характерна за SCLC. Линията е биохимичен и морфологичен вариант на SCLC, който експресира неврон-специфична енолаза и мозъчния изоензим на креатинкиназата. При него не се откриват нива на L-DOPA декарбоксилаза или бомбезин. Клетките произвеждат необичайно голяма мРНК p53 (3,7 kb). ДНК последователностите на c-myc се амплифицират около 25 пъти, а РНК на c-myc се увеличава 24 пъти в сравнение с нормалните клетки. Съобщава се, че клетките експресират функционални ANP рецептори, но третирането с ANP не променя модела им на растеж. Клетките се оцветяват положително за неврофиламенти и виментин. Има експресия на mRNA на v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras и c-raf 1.
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином на белия дроб
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • NCI-H-82
  • H82
  • H-82
  • NCI H82
  • NCIH82
  • H82sclc

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, образува трансплантируеми тумори с нетипична хистология на SCLC в голи мишки
Кариотип
Това е почти триплоидна човешка клетъчна линия. Модалният брой хромозоми е 58, като се срещат в 44%, а полиплоидността е 3%. Всяка клетка има две копия на нормална х-хромозома. Y хромозомата не е открита в препаратите с Q ленти.

04Идентификатори

Източник
NCI-H82 (каталожен номер 300442 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1591

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Рецептор за инсулиноподобен растежен фактор II (IGF II), предсърден натриуретичен пептид (ANP)
Експресия на протеини
P53 положителен
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, фенотипна честота Продукт = 0,0082

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 5 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 3 x 105 до 1 x 106 клетки/ml за оптимален растеж.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
41 години
Етническа принадлежност
Кавказки