- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Asiakirjat
NCI-H82
Cell line · Tuotenumero 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Räätälöinti / Suositukset
- NCI-H82Cell line€430.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- A.F. Gazdar ja kumppanit saivat NCI-H82-solulinjan vuonna 1978 pienisoluista keuhkosyöpää sairastavan potilaan pleuranesteestä. Alkuperäisen kasvaimen morfologia ei ollut SCLC:lle tyypillinen. Linja on SCLC:n biokemiallinen ja morfologinen muunnos, joka ilmentää neuronispesifistä enolaasia ja aivojen kreatiinikinaasin isoentsyymiä. Siinä ei ole havaittavissa L-DOPA-dekarboksylaasin tai bombesiinin pitoisuuksia. Solut tuottavat epänormaalin kokoista p53-mRNA:ta (3,7 kb). C-myc-DNA-sekvenssit monistuvat noin 25-kertaisiksi, ja c-myc-RNA:n määrä lisääntyy 24-kertaiseksi normaaleihin soluihin verrattuna. Solujen raportoidaan ilmentävän toiminnallisia ANP-reseptoreita, mutta ANP-hoito ei muuta niiden kasvutapaa. Solut värjäytyvät positiivisesti neurofilamenteille ja vimentiinille. Soluissa ilmentyy v-fes-, v-fms-, Ha-ras-, Ki-ras-, N-ras- ja c-raf 1 -mRNA:ta.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Jousitus
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, muodostaa siirtokelpoisia kasvaimia, joilla on epätyypillinen SCLC-histologia alasti elävissä hiirissä
- Karyotyyppi
- Tämä on lähes triploidi ihmisen solulinja. Modaalinen kromosomiluku on 58, ja sitä esiintyy 44 prosentissa, ja polyploidia on 3 prosentissa. Jokaisessa solussa oli kaksi kopiota normaalista x-kromosomista. Y-kromosomia ei havaittu Q-bändipreparaatissa.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- NCI-H82 (Cytionin luettelonumero 300442)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Ilmentyminen ja alttius
- Ilmentyvät reseptorit
- Insuliinin kaltaisen kasvutekijä II:n reseptori (IGF II), eteisnatriureettinen peptidi (ANP)
- Proteiinin ilmentyminen
- P53-positiivinen
- Isoentsyymit
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotyypin frekvenssituote = 0,0082
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Soluviljely
- Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 41 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)
.jpg)
.jpg)
