- Tissue
- Pulmón
- Disease
- Carcinoma pulmonar de células pequeñas
- Metastatic site
- Derrame pleural
- Synonyms
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Documents
01General information
- Description
- La línea celular NCI-H82 fue obtenida por A.F. Gazdar y sus colaboradores en 1978 a partir del líquido pleural de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La morfología del tumor original no era característica del SCLC. Esta línea es una variante bioquímica y morfológica del SCLC que expresa enolasa específica de neuronas y la isoenzima cerebral de la creatina quinasa. No presenta niveles detectables de L-DOPA descarboxilasa ni de bombesina. Las células producen un ARNm de p53 de tamaño anormal (3,7 kb). Las secuencias de ADN de c-myc se amplifican aproximadamente 25 veces, y hay un aumento de 24 veces en el ARN de c-myc en comparación con las células normales. Se ha informado que las células expresan receptores funcionales de ANP, pero el tratamiento con ANP no altera su patrón de crecimiento. Las células se tiñen positivamente para neurofilamentos y vimentina. Se observa expresión de los ARNm de v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras y c-raf 1.
- Tissue
- Pulmón
- Disease
- Carcinoma pulmonar de células pequeñas
- Metastatic site
- Derrame pleural
- Synonyms
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sí, forma tumores trasplantables con histología atípica de SCLC en ratones desnudos
- Karyotype
- Esta es una línea celular humana casi triploide. El número modal de cromosomas es 58, que se presenta en el 44 % de los casos, con una poliploidía del 3 %. Cada célula tenía dos copias de un cromosoma X normal. No se detectó el cromosoma Y en las preparaciones con bandas Q.
04Identifiers
- Citation
- NCI-H82 (número de catálogo de Cytion 300442)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Receptor del factor de crecimiento similar a la insulina II (IGF II), péptido natriurético auricular (ANP)
- Protein expression
- Positivo para P53
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Producto de la frecuencia fenotípica = 0,0082
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Subculturing
- Mantenga los cultivos agregando o reemplazando el medio periódicamente. Inicie los cultivos con una densidad de 5 × 10⁵ células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml para lograr un crecimiento óptimo.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 41 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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