- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Kleinzelliges Bronchialkarzinom
- Metastasenherd
- Pleuraerguss
- Synonyme
- NCI-H-82, H82, H-82, NCI H82, NCIH82, H82sclc
Dokumente
NCI-H82
Cell line · Artikelnummer 300442
The NCI-H82 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1978 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The morpholog...
Anpassung / Empfehlungen
- NCI-H82Cell line€430.00
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
- Die NCI-H82-Zelllinie wurde 1978 von A.F. Gazdar und Mitarbeitern aus der Pleuraflüssigkeit eines Patienten mit kleinzelligem Lungenkrebs gewonnen. Die Morphologie des ursprünglichen Tumors war nicht charakteristisch für SCLC. Die Linie ist eine biochemische und morphologische Variante von SCLC, die neuronenspezifische Enolase und das Hirnisoenzym der Kreatinkinase exprimiert. Sie weist keine nachweisbaren Mengen von L-DOPA-Decarboxylase oder Bombesin auf. Die Zellen produzieren eine abnorm große p53 mRNA (3,7 kb). Die c-myc-DNA-Sequenzen sind um das 25-Fache vergrößert, und die c-myc-RNA ist im Vergleich zu normalen Zellen um das 24-Fache erhöht. Es wird berichtet, dass die Zellen funktionelle ANP-Rezeptoren exprimieren, aber eine Behandlung mit ANP verändert ihr Wachstumsmuster nicht. Die Zellen weisen eine positive Färbung für Neurofilamente und Vimentin auf. Es gibt eine Expression von v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras und c-raf 1 mRNAs.
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Kleinzelliges Bronchialkarzinom
- Metastasenherd
- Pleuraerguss
- Synonyme
- NCI-H-82
- H82
- H-82
- NCI H82
- NCIH82
- H82sclc
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Männlich
- Wachstumseigenschaften
- Aussetzung
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Tumorauslösend
- Ja, bildet transplantierbare Tumore mit untypischer SCLC-Histologie in Nacktmäusen
- Karyotyp
- Es handelt sich um eine nahezu triploide menschliche Zelllinie. Die modale Chromosomenzahl beträgt 58, die Polyploidie liegt bei 44 %, die Polyploidie bei 3 %. Jede Zelle hatte zwei Kopien eines normalen X-Chromosoms. Das Y-Chromosom wurde in Q-Band-Präparaten nicht nachgewiesen.
04Bezeichner
- Quellenangabe
- NCI-H82 (Cytion-Katalognummer 300442)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1591
05Expression und Anfälligkeit
- Exprimierte Rezeptoren
- Rezeptor für den insulinähnlichen Wachstumsfaktor II (IGF II), atriales natriuretisches Peptid (ANP)
- Proteinexpression
- P53 positiv
- Isoenzyme
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt = 0,0082
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Subkultivierung
- Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 41 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
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