OK

La lignée cellulaire OK est une culture cellulaire permanente de type épithélial dérivée du tissu rénal d'une femelle adulte d'opossum américain (Didelphis virginiana). Établie in vitro, cette lignée cellulaire se distingue par son nombre modal chromosomique non diploïde de 23 et son adaptabilité aux conditions de culture tissulaire. Initialement dérivée de types cellulaires mixtes, la culture a évolué vers des cellules épithéliales prédominantes après huit passages. La lignée cellulaire OK a été largement caractérisée en termes de morphologie, de constitution chromosomique et de dynamique de croissance, ce qui en fait un modèle robuste pour les études cytogénétiques et d'isolation chromosomique.

L'une des principales caractéristiques de la lignée cellulaire OK est son utilité pour les études chromosomiques, en particulier pour l'isolement du chromosome X des mammifères. Le chromosome X de l'opossum est nettement plus petit (environ 30 % de moins que les plus petits autosomes) et ne contient pas de grands blocs d'hétérochromatine constitutive, ce qui facilite la séparation des autosomes par des techniques telles que la microfluorométrie de flux et la centrifugation en gradient. Le caryotype stable des cellules OK, avec la présence d'un chromosome marqueur métacentrique distinctif, renforce leur application dans les études génomiques et chromosomiques. L'inactivation préférentielle du chromosome X paternel chez ce marsupial fournit un modèle comparatif pour l'étude des mécanismes sous-jacents à l'inactivation du chromosome X chez les mammifères.

Les cellules OK ont également fait preuve de résilience et d'adaptabilité dans diverses conditions de culture, y compris les variations de sérum et différents agents d'arrêt mitotique comme le Velban (sulfate de vinblastine), qui est particulièrement efficace pour obtenir des indices mitotiques élevés pour l'isolement des chromosomes. La capacité de la lignée cellulaire à se synchroniser et à produire des rendements élevés de cellules en métaphase souligne en outre sa pertinence pour des analyses chromosomiques détaillées, y compris la quantification du contenu en ADN et l'imagerie à haute résolution des étalements chromosomiques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie