OK

A linha celular OK é uma cultura permanente de células de tipo epitelial derivada do tecido renal de uma fêmea adulta de gambá americano (Didelphis virginiana). Estabelecida in vitro, esta linha celular é notável pelo seu número cromossómico modal não diploide de 23 e pela sua adaptabilidade às condições de cultura de tecidos. Inicialmente derivada de tipos celulares mistos, a cultura evoluiu para células predominantemente epiteliais após oito passagens. A linha celular OK foi amplamente caracterizada em termos de morfologia, constituição cromossómica e dinâmica de crescimento, o que a torna um modelo robusto para estudos citogenéticos e de isolamento cromossómico.

Uma das principais caraterísticas da linha celular OK é a sua utilidade em estudos cromossómicos, especialmente para o isolamento do cromossoma X dos mamíferos. O cromossoma X do gambá é significativamente mais pequeno (cerca de 30% mais pequeno do que os autossomas mais pequenos) e não contém grandes blocos de heterocromatina constitutiva, o que facilita a separação dos autossomas através de técnicas como a microfluorometria de fluxo e a centrifugação em gradiente. O cariótipo estável das células OK, com a presença de um cromossoma marcador metacêntrico distinto, aumenta a sua aplicação em estudos genómicos e cromossómicos. A inativação preferencial do cromossoma X paterno neste marsupial constitui um modelo comparativo para o estudo dos mecanismos subjacentes à inativação do cromossoma X nos mamíferos.

As células OK também demonstraram resiliência e adaptabilidade em várias condições de cultura, incluindo variações de soro e diferentes agentes de bloqueio mitótico, como o Velban (sulfato de vinblastina), que é particularmente eficaz para obter índices mitóticos elevados para o isolamento dos cromossomas. A capacidade da linha celular para se sincronizar e produzir elevados rendimentos de células metafásicas sublinha ainda mais a sua aptidão para análises cromossómicas pormenorizadas, incluindo a quantificação do conteúdo de ADN e a obtenção de imagens de alta resolução de espalhamento cromossómico.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia